[发明专利]一种基于CRISPR/Cas12a和恒温扩增的DENV一步法核酸检测方法

摘要

本发明公开一种基于CRISPR/Cas12a和恒温扩增的DENV一步法核酸检测方法，属于生物技术领域。本发明设计的crRNA与DENV‑1靶序列的识别结合具有高度特异性，有效保证检测结果的准确性。本发明设计的crRNA不受PAM序列的限制，只能特异性识别剪切单链DNA，而不能剪切双链DNA，因此Cas12a蛋白不会消耗用于扩增的模板，扩增与Cas12a‑crRNA检测可在同一体系同时进行，实现了高灵敏度。本发明只需要常温下40min便可通过试纸条显色或荧光强度读取检测结果，检测时间短，不需要昂贵、复杂的控温仪器，只需要一个恒温装置和荧光检测设备便可完成检测反应，检测成本低。