[发明专利]猫干扰素γ的可溶性原核表达和纯化方法及应用有效
| 申请号： | 202110426900.2 | 申请日： | 2021-04-20 |
| 公开（公告）号： | CN113121672B | 公开（公告）日： | 2023-01-03 |
| 发明（设计）人： | 魏衍全;张勇;成述儒;武小椿;任丽君 | 申请（专利权）人： | 甘肃农业大学 |
| 主分类号： | C07K14/57 | 分类号： | C07K14/57;C12N15/70;C12N15/62;C12N15/64;C12N1/21;C07K1/22;C12R1/19 |
| 代理公司： | 深圳国联专利代理事务所(特殊普通合伙) 44465 | 代理人： | 钟志芸 |
| 地址： | 730000 *** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | 本发明提供了猫干扰素γ的可溶性原核表达和纯化方法及应用，属于生物基因工程领域。该方法包括的步骤有：⑴FeIFN‑γ蛋白的信号肽序列和理化性质分析；⑵原核表达质粒pET28a‑SUMO‑FeIFN‑γ的构建；⑶含重组质粒的BL21细菌的诱导表达与重组蛋白的可溶性分析；⑷SUMO‑FeIFN‑γ融合蛋白最佳表达条件的筛选；⑸SUMO‑FeIFN‑γ融合蛋白的大量表达和纯化；⑹SUMO‑FeIFN‑γ融合蛋白的酶切和纯化。本发明克隆不包含信号肽的成熟蛋白基因序列，构建了原核表达质粒，并转化BL21感受态细胞进行表达和纯化，使用了带有SUMO助溶标签的pET28a‑SUMO表达载体，从而实现了目的蛋白的可溶性表达，外源蛋白的可溶性表达水平高，具备很高的生物学活性，纯化步骤简便，为后期抗病毒药物的开发奠定了基础。 | ||
| 搜索关键词： | 干扰素 可溶性 表达 纯化 方法 应用 | ||
【主权项】：
暂无信息
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