[发明专利]一种从香菇中提取分离抗肿瘤活性蛋白的制备方法

摘要

本发明提供了一种从香菇中提取分离抗肿瘤活性蛋白的制备方法，包括以下步骤：(1)预处理：将新鲜香菇洗净，用液氮速冻，研磨粉碎，过筛；(2)复合酶解：用生理盐水浸没香菇粉末，加入纤维素酶、半纤维素酶和蛋白酶抑制剂，搅拌12‑16h；(3)提取活性蛋白：用超临界CO2流体萃取复合酶解后的香菇粉末，在分离釜中进行分离，得到活性蛋白；(4)分离活性蛋白：经SourceQ阴离子交换层析分离并除去多糖，再经Superdex200凝胶过滤层析，其间用人肺腺癌A549细胞检测其细胞毒性，分离得到抗肿瘤活性高的香菇蛋白质提取物LEP；(5)冻干保存。本发明通过复合酶解和超临界萃取工艺达到高效提取香菇活性蛋白的效果，采用活性跟踪分离方法提升了分离抗肿瘤活性蛋白的目的性。