[发明专利]一种高通量合成单克隆抗体稳转表达细胞株的方法在审
申请号: | 202110232519.2 | 申请日: | 2021-03-02 |
公开(公告)号: | CN112852747A | 公开(公告)日: | 2021-05-28 |
发明(设计)人: | 张洋;黄爽茹 | 申请(专利权)人: | 浙江正熙生物技术股份有限公司 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12N15/13;C12N15/85;C07K16/24 |
代理公司: | 北京精金石知识产权代理有限公司 11470 | 代理人: | 尉月丽 |
地址: | 313220 浙江省湖州市*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种高通量合成单克隆抗体稳转表达细胞株的方法,包括如下步骤:S1.制备目标抗原并采用目标抗原对动物进行免疫;S2.免疫完成后取动物脾脏,采用流式细胞仪筛选出记忆B细胞及浆细胞,制成单细胞悬液;S3.将单细胞的mRNA进行扩增逆转录合成cDNA,扩增抗体重链和轻链的可变区,分别连接至载体;S4.进行细胞转染,即得到单克隆抗体稳转表达细胞株。由本发明方法制备得到的细胞株相较于传统的杂交瘤细胞株稳定,并且分泌的抗体的批次间生产稳定,产量比杂交瘤细胞株高10‑50倍以上,能广泛应用工业化生产。 | ||
搜索关键词: | 一种 通量 合成 单克隆抗体 表达 细胞株 方法 | ||
【主权项】:
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