[发明专利]酿酒酵母单一含硒蛋白的制备方法有效
| 申请号： | 202110178408.8 | 申请日： | 2021-02-07 |
| 公开（公告）号： | CN113214370B | 公开（公告）日： | 2023-04-28 |
| 发明（设计）人： | 谢志雄;刘继业 | 申请（专利权）人： | 武汉大学 |
| 主分类号： | C07K14/395 | 分类号： | C07K14/395;C07K1/22;C12N15/31;C12N15/70 |
| 代理公司： | 武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人： | 肖明洲 |
| 地址： | 430072 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种酿酒酵母单一含硒蛋白的制备方法。步骤如下：克隆酿酒酵母中含有半胱氨酸的蛋白相对应的基因，连接到原核表达载体上，转入原核表达宿主；构建好的菌株活化后转接到新鲜的LB培养基中培养，冰上冷却，然后加入终浓度为0.1‑0.5mM的IPTG，培养10h，加入终浓度为0.5‑2.5mM的硒源培养0.5‑1h；收集菌体，去除上清，然后用BindingBuffer重悬细胞，超声破碎，4℃，6500‑8500G离心20‑40min，取上清，用镍柱纯化目的蛋白，洗脱液为Elution Buffer。本发明获得了酿酒酵母单一含硒蛋白，纯化后的蛋白纯度高，成本廉价，操作简单。 | ||
| 搜索关键词： | 酿酒 酵母 单一 蛋白 制备 方法 | ||
【主权项】：
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