[发明专利]一种可追踪细胞分化发育的双重诱导mCreER系统及其建立与应用

摘要

本发明涉及一种可追踪细胞分化发育的双重诱导mCreER系统，包括mCreER和mTEVp蛋白；mCreER和mTEVp蛋白分别通过FRB蛋白、FKBP蛋白与定位于细胞膜上的CD8连接，相对应固定在细胞膜上；当加入雷帕霉素时，FKBP蛋白与FRB蛋白相互靠近并结合形成复合体，诱导mTEVp蛋白的切割，使mCreER从质膜释放，并在他莫昔芬作用下入核介导loxP位点重组，实现重组时间的可控性。本发明的双重诱导mCreER系统只有在诱导的条件下，Cre重组酶才能进入到细胞核中进行重组，避免了传统CreER系统自发重组现象。mCreER是膜蛋白，相对表达量比较低，经诱导进入细胞核后，能够减少Cre重组酶的脱靶现象，降低细胞毒性，提高组织特异性；实现对组织细胞更严密和精确的追踪，为细胞发育、组织再生及疾病治疗提供新思路。