[发明专利]一种利用SUMO融合表达系统制备重组肝素酶III的方法及其所制备的SUMO_肝素酶III融合蛋白

摘要

本发明公开了利用SUMO融合表达系统制备重组肝素酶III的方法及其所制备的肝素酶III，该制备方法包括下列步骤：选择来自肝素黄杆菌(Pedobacter heparinus)的肝素酶III序列，其氨基酸序列如SEQIDNo.1所示，共659aa；去除信号肽序列，获得肝素酶III的DNA序列，如SEQIDNo.2；将所述肝素酶III的DNA序列插入带有N端SUMO蛋白标签的pSMART载体质粒；将正确的质粒转化至BL21(DE3)大肠杆菌感受态细胞中，挑取单克隆，通过发酵和纯化获得融合蛋白；用SUMO蛋白酶将SUMO标签蛋白从融合蛋白上切割下来，即获得肝素酶III。本发明的优点是：提高目标蛋白质的可溶性、促进目标蛋白质的正确折叠，避免形成包涵体；降低纯化成本、提高纯化效率；SUMO蛋白标签分子量较小，对肝素酶III的酶活性影响较小，获得纯化的肝素酶III。