[发明专利]一种用于NGS平台的尿液外泌体RNA提取和文库构建方法在审
| 申请号： | 202110002459.5 | 申请日： | 2021-01-04 |
| 公开（公告）号： | CN112662739A | 公开（公告）日： | 2021-04-16 |
| 发明（设计）人： | 许明炎;张晓妮;李慧;林郁松 | 申请（专利权）人： | 深圳海普洛斯医学检验实验室 |
| 主分类号： | C12Q1/6806 | 分类号： | C12Q1/6806;C12N15/10;C40B50/06 |
| 代理公司： | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人： | 薛红凡 |
| 地址： | 518000 广东省深圳市南山区*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种用于NGS平台的尿液外泌体RNA提取和文库构建方法，属于医学和生物技术领域。通过添加助沉试剂到尿液中实现外泌体有效沉降，解决RNA材料受限的问题，同时采用Trizol试剂直接对外泌体进行RNA提取且去除回溶、纯化步骤，减少RNA在提取中损失和降解，为后续建库提供合格原料。通过修复cDNA损伤，优化末端修复加A、纯化步骤，以及文库扩增反应循环数，使用高保真酶预混液进行PCR扩增进行建库，该文库保存了外泌体分子多样性，为NGS技术在液体活检和诊断的应用提供可靠样本。该方法有效解决了尿液样本外泌体含量低，提取RNA总量低，无法有效建库，利用NGS平台测序的难题。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 用于 ngs 平台 尿液 外泌体 rna 提取 文库 构建 方法 | ||
【主权项】：
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