[发明专利]一种通过阶段溶氧控制提高大肠杆菌蛋白表达量的方法在审

专利信息
申请号: 202011549795.3 申请日: 2020-12-24
公开(公告)号: CN114672531A 公开(公告)日: 2022-06-28
发明(设计)人: 文良柱;王法兴;赵珊珊;徐晓峰 申请(专利权)人: 江苏万邦医药科技有限公司;江苏万邦生化医药集团有限责任公司
主分类号: C12P21/00 分类号: C12P21/00;C12N1/20;C12R1/19
代理公司: 南京天华专利代理有限责任公司 32218 代理人: 吴爽;张磊
地址: 221004 江苏省*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明公开了一种通过阶段溶氧控制提高大肠杆菌蛋白表达量的方法;包括:菌种活化、种子培养和发酵罐发酵,所述发酵罐发酵分为初始培养阶段、补料生长阶段和诱导阶段;其中诱导阶段分为第一阶段诱导和第二阶段诱导;第一阶段诱导将溶氧控制在25%以上,第二阶段诱导溶氧控制在0‑10%。本发明将诱导分为两个阶段并控制各阶段培养条件,使大肠杆菌基因工程菌实现高密度发酵。第一阶段诱导时发酵罐处于最大供氧状态,使大肠杆菌处于高代谢状态,实现蛋白的快速表达;第二阶段诱导时通过降低发酵罐的供氧状态,进而降低碳源和氮源补料量,从而使菌体处于较低代谢状态,可以减缓菌体老化和自溶,维持菌体活力,实现蛋白的进一步表达。
搜索关键词: 一种 通过 阶段 控制 提高 大肠杆菌 蛋白 表达 方法
【主权项】:
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