[发明专利]一种CTSDR与CRISPR/Cas联用检测miRNA的荧光传感器及其制备与应用有效

专利信息
申请号: 202011522011.8 申请日: 2020-12-21
公开(公告)号: CN112626179B 公开(公告)日: 2023-05-30
发明(设计)人: 颜玉蓉;丁世家;张德才;李星蓉;郑清源;甘秀峰;刘萍;舒晓佳;蔡晓颖;白惠洁;凡宁可;程文倩 申请(专利权)人: 重庆医科大学
主分类号: C12Q1/6825 分类号: C12Q1/6825;C12Q1/682;C12Q1/6806;G01N21/64
代理公司: 上海光华专利事务所(普通合伙) 31219 代理人: 殷兴旺
地址: 400016*** 国省代码: 重庆;50
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摘要: 发明属于荧光传感器技术领域,具体公开了一种CTSDR与CRISPR/Cas联用检测miRNA的荧光传感器及其制备与应用。所述荧光传感器的制备和检测miRNA过程为:采用DNA单链探针C和B制备双链产物C‑B复合物,将C‑B复合物与单链F、靶序列T(miRNA)混合,孵育,获得含PAM位点的双链DNA,即Cas12a激活剂;再加入预组装的Cas12a‑crRNA复合物和标记有荧光猝灭基团的报告探针,混合,孵育;反应完成后,对蛋白进行灭活;通过对荧光信号的检测即可获知靶物质miRNA的含量。本发明的荧光传感器将立足点介导的级联链置换反应和CRISPR/Cas12a系统结合实现级联信号放大和对miRNA的高灵敏检测。本传感器制备及检测方法简便、成本低,能有效防止非特异性反应的发生,稳定性和重现性良好。
搜索关键词: 一种 ctsdr crispr cas 联用 检测 mirna 荧光 传感器 及其 制备 应用
【主权项】:
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