[发明专利]一种鸽嗉囊成纤维细胞的分离及原代培养方法

摘要

本发明提供了一种鸽嗉囊成纤维细胞分离及原代培养方法，包含以下步骤：取胚胎期鸽嗉囊组织，清洗后，将嗉囊组织剪成1mm3大小，均匀平铺细胞培养皿底部，加入少量FBS，置于细胞培养箱中6～8h后取出，加入完全培养基，继续培养，之后每隔2～3d更换一次培养基，培养5～7d即得到汇合度80％～90％的原代细胞。传代时使用提前预热至37℃的PBS清洗原代细胞后，加入胰蛋白酶消化，待细胞在显微镜下皱缩变圆时，加入完全培养基，终止消化，使用移液枪轻轻吹打细胞，转移至15ml离心管中，离心。重新加入完全培养基重悬细胞，按照1:2比例传代培养，置于细胞培养箱中进行培养，定时更换培养基。本发明所述原代分离方法操作简单，获得的细胞量大、纯度高，能够后续稳定培养。