[发明专利]一种基于CRISPR/Cas9的白桦基因编辑方法有效
| 申请号： | 202011377672.6 | 申请日： | 2020-11-30 |
| 公开（公告）号： | CN113430194B | 公开（公告）日： | 2023-04-07 |
| 发明（设计）人： | 曾凡锁;高尚珠;麻凯;齐凤慧;陈晓慧;詹亚光 | 申请（专利权）人： | 东北林业大学 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N9/22;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/00 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 150040 黑龙*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于CRISPR/Cas9的白桦基因编辑方法，以白桦中高度保守的BpPDS和BpUVR8为靶基因，在其保守结构域上分别选取了1个和4个靶位，共设计了5个靶序列，构造了pU3b‑sgRNA‑UBQ1‑Cas9转化载体。利用瞬时转染初步鉴定了5个靶序列与白桦基因组的适配度，稳定的农杆菌转化法被用于外源DNA的整合，初步说明BpPDS和BpUVR8‑1这两个靶位可以编辑白桦基因组；BpPDS与BpUVR8‑1稳定遗传转化的编辑效率分别为41.67％、100％，纯合单株的百分比分别为37.5％、100％。该方法的建立一方面，可用于初步鉴定载体的活性，筛选活性较大的靶位，提高转化效率；其次，可用于获得白桦CRISPR/Cas9突变体植株，方便生产规范化，对加快白桦功能基因的研究具有重要意义。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 crispr cas9 白桦 基因 编辑 方法 | ||
【主权项】：
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