[发明专利]严重急性呼吸综合征冠状病毒2病毒样颗粒的制备、纯化和鉴定方法有效

专利信息
申请号: 202010912170.2 申请日: 2020-09-02
公开(公告)号: CN112250738B 公开(公告)日: 2023-05-12
发明(设计)人: 米友军;谢涛;祝秉东;谭继英;雒艳萍;牛红霞;李菲;韩江媛;吕薇;王娟 申请(专利权)人: 兰州大学
主分类号: C07K14/165 分类号: C07K14/165;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19
代理公司: 北京兴智翔达知识产权代理有限公司 11768 代理人: 郭卫芹
地址: 730000 甘肃*** 国省代码: 甘肃;62
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摘要: 发明提供严重急性呼吸综合征冠状病毒2病毒样颗粒的制备方法,包括以下步骤:将pFastBacDual双表达载体改造为三表达载体,将SARS‑CoV‑2的M、S、E基因进行密码子优化,然后将密码子优化的M、S基因依次分别构建至多角体蛋白pPH启动子后,将E基因构建至pP10启动子后,获得表达EMS重组质粒;将EMS重组质粒转化至DH10 BacTM大肠杆菌中,经蓝白筛选挑取白色阳性克隆,提取杆粒转染ExpiSf9TM细胞,胞内共表达E、M、S结构蛋白,自组装形成病毒样颗粒。本发明成功构建了EMS三表达载体,并利用杆状昆虫系统在ExpiSf9TM细胞内成功表达了SARS‑CoV‑2VLPs。
搜索关键词: 严重 急性 呼吸 综合征 冠状病毒 病毒 颗粒 制备 纯化 鉴定 方法
【主权项】:
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