[发明专利]一种通过多位点整合表达框提高毕赤酵母分泌表达猪γ干扰素的方法在审
| 申请号： | 202010762914.7 | 申请日： | 2020-07-31 |
| 公开（公告）号： | CN111926031A | 公开（公告）日： | 2020-11-13 |
| 发明（设计）人： | 李伟;付建华;张志清 | 申请（专利权）人： | 广东海纳川生物科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/81 | 分类号： | C12N15/81;C12N15/66;C12N15/65;C12N15/23;C12P21/02;C12R1/84 |
| 代理公司： | 深圳市君胜知识产权代理事务所(普通合伙) 44268 | 代理人： | 谭志鹏 |
| 地址： | 528500 广东省佛山*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种通过多位点整合表达框提高毕赤酵母分泌表达猪γ干扰素的方法，包括如下步骤：S1.优化猪γ干扰素基因序列；S2.构建表达载体pPICZαA‑pIFNg；S3.构建表达载体pPIC9K‑pIFNg；S4.构建分泌表达猪γ干扰素的毕赤酵母工程菌；S5.诱导表达重组猪γ干扰素；通过在毕赤酵母基因组的醇氧化酶‑1基因位点和三功能组氨酸脱氢酶基因位点分步整合带有博来霉素和遗传霉素抗性基因的猪γ干扰素表达盒；通过多位点整合和不同抗生素标记加压筛选，提高猪γ干扰素的表达量，使猪γ干扰素的分泌表达量提高到1.33g/L，比现有技术提高了30％，而且重组毕赤酵母菌株稳定性高。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 通过 多位点 整合 表达 提高 酵母 分泌 干扰素 方法 | ||
【主权项】：
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