[发明专利]一种高通量集成化磷酸化蛋白组学检测方法在审

专利信息
申请号: 202010426215.5 申请日: 2020-05-19
公开(公告)号: CN111579796A 公开(公告)日: 2020-08-25
发明(设计)人: 田瑞军;李鹏飞;孔倩 申请(专利权)人: 南方科技大学
主分类号: G01N33/68 分类号: G01N33/68;G01N30/02;G01N30/72
代理公司: 北京品源专利代理有限公司 11332 代理人: 潘登
地址: 518000 广东省*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 发明提供了一种高通量集成化磷酸化蛋白组学检测方法,通过将连接在链霉亲和素板上的探针与诱饵蛋白形成捕获骨架,对酪氨酸磷酸化蛋白复合物进行富集捕获,酶解得到多肽,实现减少100倍探针用量的条件下300倍灵敏度的提升。利用150μm内径自填色谱柱高效液相色谱实现短梯度快速分离,结合Q Extractive HF‑X质谱仪在DIA数据采集模式下进行高效检测,可在不损失定性与定量检测性能条件下,实现单个样品35min内分离检测。实现了对不同EGF刺激时间下与不同浓度抑制剂作用下细胞中相关信号通路蛋白磷酸化条件瞬时变化的鉴定。为酪氨酸磷酸化蛋白质复合物的富集与鉴定提供了高通量、高灵敏、快速的检测方法。
搜索关键词: 一种 通量 集成化 磷酸化 蛋白组 检测 方法
【主权项】:
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