[发明专利]阿魏酸酯酶BpFae基因的重组表达载体和重组菌,及重组表达的方法有效

专利信息
申请号: 202010321014.9 申请日: 2020-04-22
公开(公告)号: CN111394382B 公开(公告)日: 2021-11-05
发明(设计)人: 范光森;孙宝国;李秀婷;富志磊;朱宇婷 申请(专利权)人: 北京工商大学
主分类号: C12N15/70 分类号: C12N15/70;C12N15/65;C12N15/66;C12N9/18
代理公司: 北京商专永信知识产权代理事务所(普通合伙) 11400 代理人: 欧阳石文
地址: 100048*** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明公开一种阿魏酸酯酶BpFae基因的重组表达载体和重组菌,并提供优化的表达条件的重组表达所述酶的方法。以出发载体是pGEX‑4T‑1构建含有本发明的阿魏酸酯酶BpFae基因表达载体,当以IPTG为诱导剂时,最优条件是:采用SOB培养基;初始pH:5.0;接种量:0.8%(v/v);诱导时机:4h;IPTG浓度:0.05mM;诱导温度:26℃;摇床转速:240rpm;诱导时间:24h,如此获得的BpFae活性最高可达2.54U/mL;当以乳糖为诱导剂,采用LB培养基;乳糖浓度:6g/L;初始pH:5.5;诱导时机:5h;诱导温度:23℃;摇床转速:240rpm;装液量:50mL/250mL;接种量:0.2%(v/v);诱导时间:32h,如此获得的BpFae活性最高可达7.43U/mL。本发明的最优诱导表达条件,可以更高效的制备阿魏酸酯酶BpFae。
搜索关键词: 阿魏酸 bpfae 基因 重组 表达 载体 方法
【主权项】:
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