[发明专利]干细胞高效表达目的蛋白的制备方法和应用方法在审
申请号: | 202010295429.3 | 申请日: | 2020-04-15 |
公开(公告)号: | CN111440821A | 公开(公告)日: | 2020-07-24 |
发明(设计)人: | 刘荣坤;刘芳;岳绪娥 | 申请(专利权)人: | 北京本真工坊生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;C12N15/67;C12N15/65;C12N15/62;C12N5/0775 |
代理公司: | 北京汇信合知识产权代理有限公司 11335 | 代理人: | 王维新 |
地址: | 102206 北京市昌平*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了一种干细胞高效表达目的蛋白的制备方法和应用方法,其中制备方法包括:从人体组织中分离干细胞并进行培养;结合PB转座子、EF1A启动子序列、KOZAK序列、所要表达的目的蛋白序列、T2A序列、所要表达目的蛋白序列、CD33信号肽序列、IRES序列、PURO序列和附加体系统,构建重组表达载体;将重组表达载体加入干细胞的培养悬液,采用电转染方式获得能够表达目的蛋白的干细胞。通过本发明的技术方案,可以将重组表达载体转移至干细胞中,迅速获得高表达的细胞,可以增加两种细胞因子的协同作用,使两种细胞因子同时表达,使重组表达载体质粒在干细胞内长时间存在并高效表达目的蛋白。 | ||
搜索关键词: | 干细胞 高效 表达 目的 蛋白 制备 方法 应用 | ||
【主权项】:
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