[发明专利]一种新的质粒载体构建方法在审
申请号: | 202010138584.4 | 申请日: | 2020-03-03 |
公开(公告)号: | CN111206044A | 公开(公告)日: | 2020-05-29 |
发明(设计)人: | 牛冬;汪滔;王德华;王磊;程锐;曾为俊;马翔 | 申请(专利权)人: | 南京启真基因工程有限公司 |
主分类号: | C12N15/66 | 分类号: | C12N15/66 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 白凤莹 |
地址: | 211306 江苏省*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种新的质粒载体构建方法。本发明首先公开了利用CRISPR/Cpf1或CRISPR/Cas9构建含有外源目的DNA分子的重组载体的方法;进一步公开了包括crRNA和Cpf1蛋白或gRNA和Cas9蛋白的成套试剂。本发明利用crRNA和Cpf1蛋白或gRNA和Cas9蛋白替代限制性内切酶对载体进行线性化,得到线性化载体;运用PCR方法得到两端含同源臂的插入片段,该两端同源臂分别与所述线性化载体两端序列同源;运用同源重组克隆的方法将插入片段重组到线性化载体上,最终构建得到新的载体,整个构建过程中未使用任何限制性内切酶及连接酶,构建方法方便、灵活、通用、简单、高效。 | ||
搜索关键词: | 一种 质粒 载体 构建 方法 | ||
【主权项】:
暂无信息
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