[发明专利]一种基于DSN循环扩增技术对多种microRNA同时进行检测的液相色谱法

摘要

本发明公开了一种基于DSN循环扩增技术对多种microRNA同时进行高灵敏度检测的液相色谱法，该检测方法包括：根据待检测的目标microRNA，设计荧光基团修饰的单链DNA，然后将其装载至磁珠表面作为检测探针；在上述检测探针中加入待检测的目标microRNA样品和DSN，充分混合，孵育；孵育后，将磁珠和未反应的DNA探针完全去除，得分离液；将分离液注入到液相色谱系统进行分离和定量。相对于现有技术，本发明方法利用液相色谱实现了对多种miRNA的同时检测，以miRNA‑155和miRNA‑21为例，该法对两者的检测限分别为0.33fM和0.24fM，线性范围均为1.0fM至10pM。所建立的方法能够成功应用于检测红斑狼疮、宫颈癌、卵巢癌患者和健康人血清样本中的miRNA‑155和miRNA‑21，以及更多种microRNA样品的检测。