[发明专利]一种双链DNA肽连接酶dDPlaseII及使用方法有效

专利信息
申请号: 202010077328.9 申请日: 2020-01-27
公开(公告)号: CN111088234B 公开(公告)日: 2022-07-15
发明(设计)人: 黄志玲;黄种山;其他发明人请求不公开姓名 申请(专利权)人: 黄种山
主分类号: C12N9/00 分类号: C12N9/00;C12P21/02
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 362300 福建省泉州*** 国省代码: 福建;35
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摘要: 发明提供了一种新型的可用于催化特定双链DNA和特定多肽共价连接的双链DNA肽连接酶dDPlaseII及其酶学特性和使用方法。dDPlaseII酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:8所示,对应的基因编码序列如SEQ ID NO:7所示;dDPlaseII酶可以识别5’末端起始为5’‑CTGGATCAT‑3’双链序列且该5’末端脱氧核糖核苷酸C为磷酸化状态的特定DNA双链和C末端起始为N’‑MANCEHL‑C’这7肽的特定多肽链,并催化这两者以共价键相互连接在一起;双链DNA和多肽连接产物在372nm波长处有特征吸收峰,可用于dDPlaseII连接酶反应活性的测定。dDPlaseII连接酶缓冲液是由pH为7.8的450mM Tris‑Hcl、100mM Mg2+、80mM NaCl、20mM ATP和8mM Triton X‑100组成,其最适反应的温度范围是35℃‑45℃,连接反应时间为3min‑10min。本发明提供的全新的双链DNA多肽连接酶,可以作为基因工程和基因分析的工具酶。
搜索关键词: 一种 dna 连接酶 ddplaseii 使用方法
【主权项】:
暂无信息
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