[发明专利]将CRISPR-Cas9系统导入人干细胞的方法在审
| 申请号： | 201911391005.0 | 申请日： | 2019-12-30 |
| 公开（公告）号： | CN110951785A | 公开（公告）日： | 2020-04-03 |
| 发明（设计）人： | 姜舒;张芸;熊斌 | 申请（专利权）人： | 深圳三智医学科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/90;C12N9/22 |
| 代理公司： | 深圳市博锐专利事务所 44275 | 代理人： | 刘晓燕 |
| 地址： | 518000 广东省深圳市南山区西丽街道*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种将CRISPR‑Cas9基因编辑系统高效导入人干细胞的方法，包括以下步骤：(1)构建获得HBB‑sgRNA‑Cas9‑T2A‑GFP‑SZ重组质粒；(2)采用Neon系统将HBB‑sgRNA‑Cas9‑T2A‑GFP‑SZ重组质粒导入人干细胞中；所述电穿孔转染的条件为：当人干细胞为人间充质干细胞时：脉冲电压1300‑1700V，脉冲时程小于30ms，脉冲次数至少一次；当人干细胞为人造血干细胞时为：脉冲电压1450‑1550V、脉冲宽度40ms，脉冲数至少一次；(3)细胞培养。本发明利用电穿孔法将CRIPSR‑Cas9基因编辑系统转入干细胞，能有效提高电穿孔转染后干细胞的存活率。 | ||
| 搜索关键词： | crispr cas9 系统 导入 干细胞 方法 | ||
【主权项】：
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