[发明专利]一种开放式培养香蕉组培苗的方法

摘要

本发明涉及一种植物种苗培育方法，具体涉及一种开放式培养香蕉组培苗的方法，属生物技术领域。开放式培养香蕉组培苗的方法包括培养瓶的消毒、培养基的配制、接种操作、组培苗的诱导培养、增殖培养和生根培养。本发明操作简单，只要在煮开的培养基中添加火山石粉和抗菌剂，搅拌均匀后分装晾凉即可使用；接种和培养无需在无菌条件下进行，工作效率大大提高，有利于降低成本；无需用到高温高压灭菌锅设备，既避免了应用特种设备带来的各种繁琐程序和安全隐患，又降低了生产成本，有利于香蕉组培苗的推广应用。

主权项

1.一种开放式培养香蕉组培苗的方法，包括如下步骤：/n(1)培养瓶的消毒：培养瓶用自来水清洗干净后，用0.1％次氯酸钠浸泡，浸泡的液面高于瓶口3cm以上，配套的塑料瓶盖用重物压着全部浸没即可，浸泡2～3h；浸泡结束后将培养瓶捞起，瓶口朝下倒扣在组培筐上晾干，盖子捞起放在可滤水的筐里，虑干水分即可；/n(2)培养基的配置：按照如下配方配制基础培养基：MS+0.3％蔗糖+4.8g/L卡拉胶+0.2g/L火山石粉，再根据香蕉组培不同生长时期的需要，添加不同种类激素和浓度，加水定容，盖上盖子煮沸2min，调节pH为5.8～6.0，加入0.1％～0.45％的植培灵抗菌剂，搅拌均匀，分装晾凉，备用；/n(3)接种操作：接种室用紫外灯照射消毒20～30min，接种的台子清洁干净后用75％酒精擦拭消毒，接种的器械用红外线接种灭菌器灭菌；/n(4)诱导培养：取生长健壮、无病虫害的香蕉吸芽为外植体，清除表面泥土晾干后，切割成6cm×6cm×8cm大小的茎尖；用酒精浸泡消毒15min，无菌水清洗5～6遍，切割成3cm×3cm×5cm大小的茎尖；用2％次氯酸钠振荡消毒8min，无菌水清洗5～6遍，切割成1cm×1cm×1cm大小的茎尖，接种于MS+4mg/L6-BA+0.3％蔗糖+4.8g/L卡拉胶+0.2g/L火山石粉+0.1％～0.45％抗菌剂的培养基中；培养室温度27±1℃，每目光照10h，前7天光照强度为500-1000lx，之后的光照强度为1000-1500lx，空气湿度60％～70％；/n(5)增殖培养：诱导培养长成丛芽后，将丛芽按2～3株一丛进行切割，接种于增殖培养基中，增殖培养基为MS+3mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA+0.3％蔗糖+4.8g/L卡拉胶+0.2g/L火山石粉+0.1％～0.45％抗菌剂，20天转接一次；培养室温度27±1℃，前7天进行暗培养，之后每日光照10h，光照强度为1000-1500lx，空气湿度60％～70％；/n(6)生根培养：当苗高不低于3cm，切割成单株后转入1/2MS+0.1mg/L NAA+0.3％蔗糖+4.8g/L卡拉胶+0.2g/L火山石粉+0.1％～0.45％抗菌剂的生根培养基中，培养20～30天即可以移栽；培养室温度27±1℃，每日光照12h，光照强度为2000-2500lx，空气湿度60％～70％。/n