[发明专利]一种组织切片的HE染色方法在审
申请号: | 201911130826.9 | 申请日: | 2019-11-19 |
公开(公告)号: | CN110672395A | 公开(公告)日: | 2020-01-10 |
发明(设计)人: | 李雄;杨达平;宋建华;刘勇青;韦翠容 | 申请(专利权)人: | 李雄 |
主分类号: | G01N1/28 | 分类号: | G01N1/28;G01N1/30 |
代理公司: | 44513 广州辰联知识产权代理有限公司 | 代理人: | 宋倩 |
地址: | 537100 广西壮族自治*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | 本发明公开一种组织切片的HE染色方法,包括以下步骤:分为组织切片的制备和切片染色两部分,其中组织切片的制备包括组织固定、组织脱水、浸蜡和包理切片步骤;切片染色包括脱蜡、洗脱二甲苯、组织入水、细胞核染色、细胞质染色、组织透明和封固步骤;采用本发明所述的方法,组织切片完整、组织切片染色均匀,细胞核、细胞质着色边界清晰,染色效果好。 | ||
搜索关键词: | 组织切片 细胞质 切片染色 制备 细胞核 细胞核染色 染色均匀 染色效果 组织固定 组织脱水 二甲苯 染色 封固 浸蜡 切片 入水 脱蜡 洗脱 着色 透明 清晰 | ||
【主权项】:
1.一种组织切片的HE染色方法,其特征在于,包括以下步骤:分为组织切片的制备和切片染色两部分:/n一、组织切片的制备/n(1)组织固定:将组织放入4%的中性甲醛溶液中浸泡一次,浸泡时长为2-5h;/n(2)组织脱水:用低浓度到高浓度梯度的乙醇溶液依次进行组织脱水四次,然后再用无水乙醇脱水三次;/n(3)透明:脱水后的组织依次放入三缸二甲苯,置换出组织内的脱水剂,每缸浸泡的时间依次是0.5h;/n(4)浸蜡:透明后的组织依次放入四缸石蜡中浸蜡,每缸浸蜡的时间依次是0.5h、0.75h、1h、1-2h,浸蜡在60-68℃的水浴环境中进行;/n(5)包埋切片:对浸蜡后的组织进行包埋切片,并烘干20-40min后得到干燥的组织切片;/n二、切片染色/n(6)脱蜡:将组织切片放入二甲苯中脱蜡四次,每次脱蜡时间为3-7min;/n(7)洗脱二甲苯:脱蜡后将切片放入无水乙醇洗脱二甲苯三次,每次1-3min;/n(8)组织入水:洗脱二甲苯后用高浓度到低浓度梯度的酒精依次进行组织进水过程,在每个浓度的酒精内浸泡1-3min,然后水洗;/n(9)细胞核染色:水洗后将组织切片放入一缸苏木精染色液中染色5-20min,然后依次进行水洗、分化、水洗,在显微镜下观察染色是否深浅合适,再用自来水冲洗蓝化5-10min;/n(10)细胞质染色:用自来水蓝化后,将组织切片放入一缸伊红染色液中染色20s-60s,然后采用低浓度到高浓度梯度的酒精依次进行清洗,每次清洗1-3min,再用无水乙醇洗涤三次,每次洗涤1-3min;/n(11)组织透明:染色完成后,将组织切片分四次放在二甲苯或环保透明剂中进行透明,每次浸泡1-3min;然后用中性树胶封固组织切片。/n
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