[发明专利]一种高产雪腐镰刀烯醇的野生菌株及其突变体的构建方法有效
申请号: | 201910977090.2 | 申请日: | 2019-10-15 |
公开(公告)号: | CN110616155B | 公开(公告)日: | 2022-09-27 |
发明(设计)人: | 刘馨;董飞;蒋翊宸;王刚;王淑芳;赫丹;徐剑宏;史建荣 | 申请(专利权)人: | 江苏省农业科学院 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12N1/02;C12N1/15;C12N15/80;C12P17/18;C12R1/77 |
代理公司: | 常州佰业腾飞专利代理事务所(普通合伙) 32231 | 代理人: | 陈丽萍 |
地址: | 210014 江苏省南京市玄武区钟灵街*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明涉及一种高产雪腐镰刀烯醇的野生菌株及其突变体的构建方法,其包括:(1)筛选获得一株高产雪腐镰刀烯醇的野生型亚洲镰刀菌,产雪腐镰刀烯醇量为来源菌株平均产量的18.34倍;(2)通过Double‑joint PCR方法构建野生型亚洲镰刀菌雪腐镰刀烯醇生物合成负调控基因FaFlbA的敲除载体,并利用PEG介导的原生质体转化方法获得野生型亚洲镰刀菌的原位替换突变体。本发明亚洲镰刀菌RR108菌株的FaFlbA基因缺失突变体中雪腐镰刀烯醇的产量显著提高,在大米培养基中约为野生型菌株的9.42倍。所述的野生菌株和原位替换突变体可以用于雪腐镰刀烯醇标准品制备,对于保障小麦的质量安全具有重要意义。 | ||
搜索关键词: | 一种 高产 镰刀 野生 菌株 及其 突变体 构建 方法 | ||
【主权项】:
1.一种高产雪腐镰刀烯醇的野生菌株,命名为Fusarium asiaticum RR108,其筛选方法为:将待筛选亚洲镰刀菌野生型菌株在PDA培养基上活化培养,25℃培养3天后在菌落边缘打取直径为5mm的菌块,接种到大米培养基中,25℃培养21天后提取雪腐镰刀烯醇毒素并测定其含量。/n
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