[发明专利]一种初步分离天然紫杉醇及紫杉烷类化合物的工业化方法

摘要

本发明公开了一种初步分离天然紫杉醇及紫杉烷类化合物的工业化方法；该方法以红豆杉枝叶为植提原料，用甲醇‑水混合液浸提，浸提液经浓缩、萃取后拌硅胶，干燥制备料胶；料胶添加丙酮水后装柱，料胶柱同大孔吸附树脂柱连接形成连续层析柱，用丙酮‑水混合液作为洗脱液梯度洗脱，通过TLC监控收集合并含有各组分的流相，再分别用大孔吸附树脂挂柱吸附各组分流相，挂住吸附完成后用丙酮洗出，分别浓缩后萃取即可得各段次粗品；本方法仅通过一次柱层析即实现天然紫杉醇、10‑脱乙酰基紫杉醇、10‑脱乙酰基巴卡亭Ⅲ的有效分离，纯化效率高，方法简单易操作、成本低，得率高，适于工业化应用和市场推广。

主权项

1.一种初步分离天然紫杉醇及紫杉烷类化合物的工业化方法，其特征在于：以红豆杉枝叶为原料，具体步骤如下：/n（1）室温条件下，用甲醇水浸泡干燥粉碎后的红豆杉枝叶7～9h，过滤，滤渣继续加甲醇水反复浸泡2～3次，收集合并滤液，滤液在65～75℃下浓缩，在浓缩液中加入与浓缩液等体积的有机溶剂，搅拌均匀后静置0.5～3h，分别收集水相和有机相，水相继续用有机溶剂反复萃取1～2次，收集合并有机相，减压浓缩得浸膏状浓缩物，浸膏状浓缩物用乙酸乙酯溶解后，按浸膏状浓缩物与硅胶的质量比为1:1.3～1.5的比例，在溶解液中添加硅胶，混匀后干燥制得料胶备用；/n（2）按质量体积比1:1～2的比例在步骤（1）料胶中添加丙酮水，混匀后获得料胶浆，料胶浆装柱，同时按料胶与大孔吸附树脂的质量比1:1～3的比例，配备大孔吸附树脂柱，将料胶柱的出液口与大孔吸附树脂柱的进液口连接，形成连续层析柱；/n（3）依次将质量浓度30～35%、40～45%、50～55%的丙酮水溶液注入料胶柱的进液口进行梯度洗脱，通过TLC板监控大孔吸附树脂柱的出液口的洗脱液，分别收集合并含有紫杉醇、10-脱乙酰基巴卡亭Ⅲ、10-脱乙酰基紫杉醇的洗脱液；/n（4）将步骤（3）收集的含有3个物质的洗脱液分别用大孔吸附树脂柱挂柱吸附，挂柱完成后用丙酮洗出，收集丙酮洗脱液，减压浓缩抽干后分别加乙酸乙酯和水萃取或加二氯甲烷和水萃取，水相再用乙酸乙酯或二氯甲烷萃取一次，收集合并有机相浓缩抽干，即得10-脱乙酰基巴卡亭Ⅲ、10-脱乙酰基紫杉醇、天然紫杉醇粗品。/n