[发明专利]一种初步分离天然紫杉醇及紫杉烷类化合物的工业化方法

说明书

本发明公开了一种初步分离天然紫杉醇及紫杉烷类化合物的工业化方法；该方法以红豆杉枝叶为植提原料，用甲醇‑水混合液浸提，浸提液经浓缩、萃取后拌硅胶，干燥制备料胶；料胶添加丙酮水后装柱，料胶柱同大孔吸附树脂柱连接形成连续层析柱，用丙酮‑水混合液作为洗脱液梯度洗脱，通过TLC监控收集合并含有各组分的流相，再分别用大孔吸附树脂挂柱吸附各组分流相，挂住吸附完成后用丙酮洗出，分别浓缩后萃取即可得各段次粗品；本方法仅通过一次柱层析即实现天然紫杉醇、10‑脱乙酰基紫杉醇、10‑脱乙酰基巴卡亭Ⅲ的有效分离，纯化效率高，方法简单易操作、成本低，得率高，适于工业化应用和市场推广。

技术领域

本发明涉及植物枝叶中天然有机化合物的提取及分离方法，具体为一种由红豆杉枝叶中初步分离天然紫杉醇及紫杉烷类化合物的工业化方法。

背景技术

二十世纪60年代末美国化学家Wall和Wani从太平洋红豆杉中分离得到了紫杉醇，并于70年代初确定了紫杉醇的化学结构。1979年，Albent Einstein 医学院的生化药理教授Su.Horwity研究发现了紫杉醇具有独特的能促进微管蛋白聚合以及抑制微管解聚的活性，即紫杉醇有独特的抗癌作用机理。1983年，紫杉醇开始进入临床研究，1992年经美国食品药品管理局（FDA）批准上市，成为国际上公认的抗癌药物之一。

长期以来，紫杉醇是从红豆杉的树皮中提取的，随着工艺技术的改进，紫杉醇的提取由红豆杉的树皮提取变成从红豆杉枝叶提取，在一定程度上保护了红豆杉植物资源。但是，红豆杉枝叶中紫杉醇的含量极少，自然条件下，红豆杉生长速度缓慢，单靠提取的天然紫杉醇无法满足市场需求。

10-脱乙酰基巴卡亭Ⅲ、10-脱乙酰基紫杉醇是存在于红豆杉枝叶、根皮中的天然有机化合物，10-脱乙酰基巴卡亭Ⅲ含量较高，且已被成功用来半合成紫杉醇及紫杉醇类似物多西紫杉醇等，多西紫杉醇抗癌活性及水溶性均优于紫杉醇，10-脱乙酰基巴卡亭Ⅲ成了目前半合成紫杉醇及多西紫杉醇的主要原料；同样 10-脱乙酰基紫杉醇也可以作为紫杉醇的前体，通过半合成得到紫杉醇。

全球肿瘤发病率居高不下，紫杉醇需求量与日俱增，在确保红豆杉植物资源不受破坏的前提下，如何高效的利用红豆杉枝叶中包含的紫杉醇及紫杉烷类化合物成了关键。

由红豆杉提取天然紫杉醇及紫杉烷类化合物存在如下问题：

（1）目前，多数天然紫杉醇及紫杉烷类初提产业未能在初提时实现各有效组分的高效分离，10-脱乙酰基巴卡亭Ⅲ、10-脱乙酰基紫杉醇、天然紫杉醇的继续纯化工艺相互交叉，一定程度上增大了分离纯化的成本及各组分的收率；

（2）天然紫杉醇及能半合成紫杉醇的前体产物市场需求量大，供不应求，如何利用有限的资源创造更多的利用价值显得越来越重要。

发明内容

针对现有工业化生产中存在的问题，本发明提供了一种从红豆杉枝叶中提取、初分离天然紫杉醇、10-脱乙酰基巴卡亭Ⅲ、10-脱乙酰基紫杉醇的工业化生产方法；该方法以红豆杉枝叶为植提原料，用甲醇-水混合液浸提，浸提液经浓缩、萃取后拌硅胶，干燥制备料胶；料胶添加丙酮水后装柱，料胶柱同大孔吸附树脂柱连接形成连续层析柱，用丙酮-水混合液作为洗脱液梯度洗脱，通过TLC监控收集合并含有各组分的流相，再分别用大孔吸附树脂挂柱吸附各组分流相，挂住吸附完成后用丙酮洗出，分别浓缩后萃取即可得各段次粗品；本方法仅通过一次柱层析即实现天然紫杉醇、10-脱乙酰基紫杉醇、10-脱乙酰基巴卡亭Ⅲ的有效分离，纯化效率高，方法简单易操作、成本低，得率高，适于工业化应用和市场推广。

本发明的目的通过如下技术方案实现：