[发明专利]一种初步分离天然紫杉醇及紫杉烷类化合物的工业化方法

权利要求书

1.一种初步分离天然紫杉醇及紫杉烷类化合物的工业化方法，其特征在于：以红豆杉枝叶为原料，具体步骤如下：

（1）室温条件下，用甲醇水浸泡干燥粉碎后的红豆杉枝叶7～9h，过滤，滤渣继续加甲醇水反复浸泡2～3次，收集合并滤液，滤液在65～75℃下浓缩，在浓缩液中加入与浓缩液等体积的有机溶剂，搅拌均匀后静置0.5～3h，分别收集水相和有机相，水相继续用有机溶剂反复萃取1～2次，收集合并有机相，减压浓缩得浸膏状浓缩物，浸膏状浓缩物用乙酸乙酯溶解后，按浸膏状浓缩物与硅胶的质量比为1:1.3～1.5的比例，在溶解液中添加硅胶，混匀后干燥制得料胶备用；

（2）按质量体积比1:1～2的比例在步骤（1）料胶中添加丙酮水，混匀后获得料胶浆，料胶浆装柱，同时按料胶与大孔吸附树脂的质量比1:1～3的比例，配备大孔吸附树脂柱，将料胶柱的出液口与大孔吸附树脂柱的进液口连接，形成连续层析柱；

（3）依次将质量浓度30～35%、40～45%、50～55%的丙酮水溶液注入料胶柱的进液口进行梯度洗脱，通过TLC板监控大孔吸附树脂柱的出液口的洗脱液，分别收集合并含有紫杉醇、10-脱乙酰基巴卡亭Ⅲ、10-脱乙酰基紫杉醇的洗脱液；

（4）将步骤（3）收集的含有3个物质的洗脱液分别用大孔吸附树脂柱挂柱吸附，挂柱完成后用丙酮洗出，收集丙酮洗脱液，减压浓缩抽干后分别加乙酸乙酯和水萃取或加二氯甲烷和水萃取，水相再用乙酸乙酯或二氯甲烷萃取一次，收集合并有机相浓缩抽干，即得10-脱乙酰基巴卡亭Ⅲ、10-脱乙酰基紫杉醇、天然紫杉醇粗品。

2.根据权利要求1所述初步分离天然紫杉醇及紫杉烷类化合物的工业化方法，其特征在于：步骤（1）用于浸提的甲醇水的质量浓度为70～80%，原料和甲醇水的质量体积比为1g:2～4mL。

3.根据权利要求1所述初步分离天然紫杉醇及紫杉烷类化合物的工业化方法，其特征在于：步骤（1）中有机溶剂为氯仿、二氯甲烷、乙酸乙酯中的一种。

4.根据权利要求1所述初步分离天然紫杉醇及紫杉烷类化合物的工业化方法，其特征在于：

步骤（2）中丙酮水中丙酮的质量浓度为20%～30%。

5.根据权利要求1所述初步分离天然紫杉醇及紫杉烷类化合物的工业化方法，其特征在于：步骤（3）中洗脱时的流速为2～3柱体积/h，每5min收集一次洗出液，通过TLC板监控，当洗出液中出现10-脱乙酰基巴卡亭Ⅲ时，改用质量浓度40～45%的丙酮水洗脱，当洗出液中出现10-脱乙酰基紫杉醇时，改用50～55%的丙酮水洗脱。

6.根据权利要求5所述初步分离天然紫杉醇及紫杉烷类化合物的工业化方法，其特征在于：步骤（3）中洗脱时每隔30min用TLC板监控一次料胶柱出液口中所含组分的情况，当料胶柱洗出液中无紫杉醇出现后，停止对料胶柱供液，改为直接从大孔吸附树脂柱中添加洗脱液。

7.根据权利要求1所述初步分离天然紫杉醇及紫杉烷类化合物的工业化方法，其特征在于：步骤（2）中大孔吸附树脂柱的树脂型号为HPD-100、AB-8或512A。

8.根据权利要求1所述初步分离天然紫杉醇及紫杉烷类化合物的工业化方法，其特征在于：步骤（4）用于挂柱吸附的大孔吸附树脂的型号为HP20、SP850或SP825L。