[发明专利]一种肝脏干细胞的分离培养方法在审
| 申请号： | 201910947258.5 | 申请日： | 2019-10-08 |
| 公开（公告）号： | CN110724663A | 公开（公告）日： | 2020-01-24 |
| 发明（设计）人： | 王克强 | 申请（专利权）人： | 王克强 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 35101 厦门原创专利事务所(普通合伙) | 代理人： | 何玲君 |
| 地址： | 010020 内蒙古自治区*** | 国省代码： | 内蒙;15 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种肝脏干细胞的分离培养方法，包括以下步骤：A、向离体肝脏注入3～5℃的保存液，使肝脏在30min内温度降低至15℃一下；B、使用缓冲液对肝脏进行冲洗20～30min；C、向肝脏开放注入灌流液，灌流液的温度为37℃，注入流速为200～300mL/min，持续2～3min；D、使用胶原酶溶液对肝脏进行浸泡消化45～60min；E、使用清洗液对肝脏进行清洗，获得肝脏干细胞悬液，离心获得肝脏干细胞；F、将获得的肝脏干细胞接入培养液进行培养，培养温度为37℃，培养时间为24～36h。本发明能够改进现有技术的不足，提高了肝脏干细胞分离培养的成功率。 | ||
| 搜索关键词： | 肝脏干细胞 肝脏 分离培养 灌流液 培养液 胶原酶溶液 离体肝脏 温度降低 保存液 缓冲液 清洗液 悬液 成功率 冲洗 浸泡 清洗 消化 改进 开放 | ||
【主权项】：
1.一种肝脏干细胞的分离培养方法，其特征在于包括以下步骤：/nA、向离体肝脏注入3～5℃的保存液，使肝脏在30min内温度降低至15℃一下；/nB、使用缓冲液对肝脏进行冲洗20～30min；/nC、向肝脏开放注入灌流液，灌流液的温度为37℃，注入流速为200～300mL/min，持续2～3min；/nD、使用胶原酶溶液对肝脏进行浸泡消化45～60min；/nE、使用清洗液对肝脏进行清洗，获得肝脏干细胞悬液，离心获得肝脏干细胞；/nF、将获得的肝脏干细胞接入培养液进行培养，培养温度为37℃，培养时间为24～36h。/n
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