[发明专利]一种HBV cccDNA与宿主互作研究模型构建及应用有效
| 申请号： | 201910837078.1 | 申请日： | 2019-09-05 |
| 公开（公告）号： | CN110592026B | 公开（公告）日： | 2020-10-23 |
| 发明（设计）人： | 武专昌;马春红;王鑫;高立芬;梁晓红;王丽媛;孙杨 | 申请（专利权）人： | 山东大学 |
| 主分类号： | C12N7/00 | 分类号： | C12N7/00;C12N15/85;G01N33/569;C12Q1/02;A61K45/00;A61P31/20;A61P1/16 |
| 代理公司： | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人： | 王志坤 |
| 地址： | 250101 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本公开属于生物工程技术领域，具体涉及一种HBV cccDNA与宿主互作研究模型构建及应用。本公开提供了一种高度模拟乙型肝炎病毒基因组cccDNA的微环DNA模型构建及其应用，通过构建pmini‑MC‑HBV‑Intron质粒，体外获得高纯度MC‑HBV微环质粒；通过优化嵌合内含子序列和RNA的二级结构，实现了嵌合内含子在RNA水平上的高效可变剪接，获得可体外高水平复制的MC‑HBV。该MC‑HBV可高度模拟HBV病毒与宿主细胞间的生理活动。本公开还建立了体外标记MC‑HBV模型和检测的技术，为揭示HBV cccDNA与宿主相互作用关系、功能调节机制和探寻HBV治疗新靶点的提供了极好的模型。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 hbv cccdna 宿主 研究 模型 构建 应用 | ||
【主权项】：
1.一种HBV cccDNA模型的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括以下步骤：/n构建真核表达载体质粒pmini-MC-HBV-Intron，转化感受态细胞挑选阳性克隆转化至感受态细胞挑取单克隆培养扩增培养得到pCMV-Cre/prcccDNA质粒，将pCMV-Cre/prcccDNA质粒、引物加入肝癌细胞中进行转染得到pgDNA，通过补加序列消除pgRNA的茎环结构，转录补加序列后的pgRNA得到所述MC-HBV微环质粒，即所述HBV cccDNA模型。/n
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于山东大学，未经山东大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201910837078.1/，转载请声明来源钻瓜专利网。
