[发明专利]一种形成新城疫病毒F蛋白融合前构象的多肽、核苷酸及构建方法和应用有效
| 申请号： | 201910819317.0 | 申请日： | 2019-08-31 |
| 公开（公告）号： | CN110511270B | 公开（公告）日： | 2020-06-23 |
| 发明（设计）人： | 刘胜旺;孙军峰;韩宗玺 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所（中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心） |
| 主分类号： | C07K14/125 | 分类号： | C07K14/125;C12N15/45;C12N15/10;C12N7/01;A61K39/17;A61P31/14;C12R1/93 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 邓宇 |
| 地址： | 150030 黑龙*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
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| 摘要： | 一种形成新城疫病毒F蛋白融合前构象的多肽、核苷酸及构建方法和应用，涉及生物技术领域。针对新城疫病毒F蛋白融合前构象结构不稳定的问题以及融合前构象的多肽免疫效力未知的技术问题，本发明提供了一种形成新城疫病毒F蛋白融合前构象的多肽，以及能够编码新城疫病毒F蛋白融合前构象的核苷酸序列，构建获得了含有上述能够编码新城疫病毒F蛋白融合前构象的核苷酸序列的重组质粒，并通过蛋白表达系统获得了能够形成新城疫病毒F蛋白融合前构象的蛋白，本发明获得的能够编码新城疫病毒F蛋白融合前构象的核苷酸序列或多肽序列可作为免疫原制备用于预防新城疫的疫苗。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 形成 新城 疫病 蛋白 融合 构象 多肽 核苷酸 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.一种形成新城疫病毒F蛋白融合前构象的多肽，其特征在于，所述多肽为optiF-P1、optiF-P2、optiF-P3或optiF-P4；所述多肽序列optiF-P1是在亲本新城疫病毒F蛋白的氨基酸序列中引入16V-16I,24G-24S,28S-28L,71R-71K,78K-78R,146K-146Q,154L-154I,402T-402A,480K-480R,489E-489D共10个突变位点，缺失了第500～553位氨基酸残基区域的跨膜区和胞质尾，在此缺失位置依次加入Fibritin三聚体结构基序以及His标签和Strep标签；/n所述的多肽序列optiF-P2是在亲本新城疫病毒F蛋白的氨基酸序列中引入16V-16I,24G-24S,28S-28L,71R-71K,78K-78R,146K-146Q,154L-154I,402T-402A,480K-480R,489E-489D共10个突变位点，将第112～117位裂解位点处的氨基酸残基RRQKRF突变为了GGQGRF，缺失了500～553位氨基酸残基区域的跨膜区和胞质尾，在此缺失位置依次加入Fibritin三聚体结构基序以及His标签和Strep标签；/n所述的多肽序列optiF-P3是在亲本新城疫病毒F蛋白的氨基酸序列中引入16V-16I,24G-24S,28S-28L,71R-71K,78K-78R,146K-146Q,154L-154I,402T-402A,480K-480R,489E-489D共10个突变位点；/n所述的多肽序列optiF-P4在亲本新城疫病毒F蛋白的氨基酸序列中引入16V-16I,24G-24S,28S-28L,71R-71K,78K-78R,146K-146Q,154L-154I,402T-402A,480K-480R,489E-489D共10个突变位点，将第112～117位氨基酸残基RRQKRF突变为GGQGRF；/n所述亲本新城疫病毒F蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，所述Fibritin三聚体结构基序的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示；所述His标签的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示；所述Strep标签的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示。/n
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