[发明专利]检测甜瓜蚜传黄化病毒的方法及其专用多克隆抗体的制备在审

专利信息
申请号: 201910653356.8 申请日: 2019-07-19
公开(公告)号: CN110596381A 公开(公告)日: 2019-12-20
发明(设计)人: 韩成贵;时兴;张绍康;王颖;张宗英;李大伟;于嘉林;尚巧霞;王献兵;张永亮 申请(专利权)人: 中国农业大学
主分类号: G01N33/569 分类号: G01N33/569;G01N33/577;G01N33/68;C12N15/40;C07K16/10;C07K14/08;C12R1/94
代理公司: 11245 北京纪凯知识产权代理有限公司 代理人: 王灏增
地址: 100193 北京市海淀*** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明公开了一种检测甜瓜蚜传黄化病毒的方法及其专用多克隆抗体。本发明首先制备了氨基酸序列如序列表中序列4或序列6所示的MABYV‑MP蛋白,然后将MABYV‑MP蛋白作为免疫原对新西兰大白兔加强免疫,获得多克隆抗体。采用Western blot,以该多克隆抗体为一抗检测甜瓜蚜传黄化病毒的运动蛋白,在瞬时表达的条件下,MABYV‑MP抗血清效价可达1:256000,建议检测工作浓度1:10000至1:80000,该多克隆抗体不仅准确率高、灵敏度高,而且特异性好。本发明可检测待测样品是否含有甜瓜蚜传黄化病毒,具有重大的应用价值和经济意义;另外也为MABYV‑MP蛋白功能的研究打下基础。
搜索关键词: 多克隆抗体 甜瓜 黄化 病毒 新西兰大白兔 氨基酸序列 抗血清效价 待测样品 加强免疫 经济意义 瞬时表达 运动蛋白 可检测 灵敏度 种检测 检测 准确率 一抗 制备 应用 研究
【主权项】:
1.一种检测和鉴定甜瓜蚜传黄化病毒的方法,其特征在于,采用以MABYV-MP蛋白作为免疫原制备的抗体进行检测,所述MABYV-MP蛋白为如下a1)或a2)或a3)或a4):/na1)氨基酸序列是序列表中序列4所示的蛋白质;/na2)氨基酸序列是序列表中序列6所示的蛋白质;/na3)在序列表中序列4所示的蛋白质的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质;/na4)将a1)或a2)或a3)所示的蛋白质经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白质。/n
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