[发明专利]检测甜瓜蚜传黄化病毒的方法及其专用多克隆抗体的制备在审
申请号: | 201910653356.8 | 申请日: | 2019-07-19 |
公开(公告)号: | CN110596381A | 公开(公告)日: | 2019-12-20 |
发明(设计)人: | 韩成贵;时兴;张绍康;王颖;张宗英;李大伟;于嘉林;尚巧霞;王献兵;张永亮 | 申请(专利权)人: | 中国农业大学 |
主分类号: | G01N33/569 | 分类号: | G01N33/569;G01N33/577;G01N33/68;C12N15/40;C07K16/10;C07K14/08;C12R1/94 |
代理公司: | 11245 北京纪凯知识产权代理有限公司 | 代理人: | 王灏增 |
地址: | 100193 北京市海淀*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了一种检测甜瓜蚜传黄化病毒的方法及其专用多克隆抗体。本发明首先制备了氨基酸序列如序列表中序列4或序列6所示的MABYV‑MP蛋白,然后将MABYV‑MP蛋白作为免疫原对新西兰大白兔加强免疫,获得多克隆抗体。采用Western blot,以该多克隆抗体为一抗检测甜瓜蚜传黄化病毒的运动蛋白,在瞬时表达的条件下,MABYV‑MP抗血清效价可达1:256000,建议检测工作浓度1:10000至1:80000,该多克隆抗体不仅准确率高、灵敏度高,而且特异性好。本发明可检测待测样品是否含有甜瓜蚜传黄化病毒,具有重大的应用价值和经济意义;另外也为MABYV‑MP蛋白功能的研究打下基础。 | ||
搜索关键词: | 多克隆抗体 甜瓜 黄化 病毒 新西兰大白兔 氨基酸序列 抗血清效价 待测样品 加强免疫 经济意义 瞬时表达 运动蛋白 可检测 灵敏度 种检测 检测 准确率 一抗 制备 应用 研究 | ||
【主权项】:
1.一种检测和鉴定甜瓜蚜传黄化病毒的方法,其特征在于,采用以MABYV-MP蛋白作为免疫原制备的抗体进行检测,所述MABYV-MP蛋白为如下a1)或a2)或a3)或a4):/na1)氨基酸序列是序列表中序列4所示的蛋白质;/na2)氨基酸序列是序列表中序列6所示的蛋白质;/na3)在序列表中序列4所示的蛋白质的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质;/na4)将a1)或a2)或a3)所示的蛋白质经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白质。/n
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