[发明专利]靶向肿瘤细胞的给药体系及其制备方法及应用

摘要

本发明提供一种靶向肿瘤细胞的给药体系及其制备方法及应用。所述给药体系是由硫辛酸‑甘氨酸‑苯丙氨酸‑亮氨酸‑甘氨酸‑阿霉素(简称LAX)修饰的金纳米棒。首先合成具有光热转化性能的金纳米棒，在其表面修饰LAX分子，得到AuNR‑LAX纳米药物传递体系。通过对乳腺癌细胞MCF‑7和MCF‑7/ADR耐药细胞的抗肿瘤活性评价，表明AuNR‑LAX具有抗肿瘤活性，且随着给药时间延长，对于敏感细胞和耐药细胞的抗肿瘤活性均增强，具有克服肿瘤细胞多药耐药的能力。与阿霉素相比AuNR‑LAX可降低其对正常细胞的损伤作用。

主权项

1.靶向肿瘤细胞的给药体系的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：A、LAX二甲基甲酰胺溶液的制备，其中所述LAX为硫辛酸‑甘氨酸‑苯丙氨酸‑亮氨酸‑甘氨酸‑阿霉素；按照多肽合成的常规方法合成甘氨酸‑苯丙氨酸‑亮氨酸‑甘氨酸，然后进行酰胺化反应，使甘氨酸‑苯丙氨酸‑亮氨酸‑甘氨酸通过多肽C端甘氨酸上的羧基与阿霉素连接，使甘氨酸‑苯丙氨酸‑亮氨酸‑甘氨酸通过多肽N端甘氨酸上的氨基与硫辛酸连接，得到LAX；将LAX溶于二甲基甲酰胺中，配制成0.09mM的LAX二甲基甲酰胺溶液；B、金纳米棒的制备b1、种子液的制备：室温搅拌下，将0.01M HAuCl₄ 0.2～0.5mL和0.1M CTAB 0.5～12.5mL混合，然后加入0.01M NaBH₄水溶液0.2～1.2mL，继续搅拌，室温静置，即得种子液；b2、室温搅拌下，将0.01M HAuCl₄ 1.5～2.5mL和0.1M CTAB 40mL混合，然后加入0.01M硝酸银水溶液0.2～1.0mL和0.1M抗坏血酸水溶液0.2～1.5mL，待溶液反应至无色，向其中加入b1所得种子液0.42mL，继续搅拌，30℃静置过夜，10000rpm转速下离心15min收集沉淀，即得金纳米棒；C、AuNR‑PEG的制备c1、PEG‑SH水溶液的制备，其中PEG‑SH的分子量为1000Da：将PEG‑SH溶于水中，配制成4.0mM的PEG‑SH水溶液；c2、将步骤B所得金纳米棒加水重新分散，配制成10nM的AuNR溶液，将1mL AuNR溶液与4.0mM PEG‑SH水溶液25μL混合，室温搅拌反应24～36h，反应结束后，8000rpm转速下离心15min收集沉淀，即得AuNR‑PEG；D、靶向肿瘤细胞的给药体系的制备将步骤C所得AuNR‑PEG加水重新分散，配制成0.06nM的AuNR‑PEG水溶液，向10.7mL AuNR‑PEG水溶液中加入步骤A 0.09mM的LAX二甲基甲酰胺溶液350μL，室温搅拌反应24～36h，反应结束后，8000rpm转速下离心15min收集沉淀，即为靶向肿瘤细胞的给药体系。