[发明专利]一种SLC45A4基因敲除的胰腺癌细胞系及其制备方法在审

专利信息
申请号: 201910547992.2 申请日: 2019-06-21
公开(公告)号: CN110283790A 公开(公告)日: 2019-09-27
发明(设计)人: 黄凤婷;张世能;李苑华;陈文颖 申请(专利权)人: 中山大学孙逸仙纪念医院
主分类号: C12N5/10 分类号: C12N5/10;C12N15/113;C12N15/867;C12N15/90;C12N15/12;C12R1/91
代理公司: 广州三环专利商标代理有限公司 44202 代理人: 颜希文;宋静娜
地址: 510000 广东省广州市*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 发明公开了一种SLC45A4基因敲除的胰腺癌细胞系及其制备方法,胰腺癌细胞系敲除的是SLC45A4基因的第四个外显子;胰腺癌细胞系HPAF‑II的制备方法,包括如下步骤:提供特异性靶向SLC45A4基因的sgRNA;构建重组表达慢病毒载体,其包括特异性靶向SLC45A4基因的sgRNA和Cas9蛋白的表达序列;以及所述重组表达慢病毒载体感染人胰腺癌细胞,得到SLC45A4基因敲除的胰腺癌细胞系HPAF‑II。本发明成功构建了一种敲除人SLC45A4基因的胰腺癌细胞系HPAF‑II,为临床研究提供遗传背景稳定的胰腺癌细胞模型;本发明从基因组层面对靶基因SLC45A4的表达进行调控,相对传统方法主要集中在转录层面进行调控的特点,本发明可以在多个层面进行调控,提高基因调控的效率。
搜索关键词: 胰腺癌细胞系 基因敲除 制备 基因 慢病毒载体 特异性靶向 重组表达 构建 敲除 调控 人胰腺癌细胞 胰腺癌细胞 表达序列 基因调控 临床研究 遗传背景 转录 靶基因 基因组 外显子 蛋白 感染 成功
【主权项】:
1.用于敲除人胰腺癌细胞SLC45A4基因的特异sgRNA,其碱基序列如SEQ ID NO.1所示。
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