[发明专利]一种推算金腰属植物基因组大小的方法

摘要

本发明公开一种推算金腰属植物基因组大小的方法。该方法包括以新鲜金腰属植物为材料、细胞核解离液配置、单细胞悬浮液制备、显微镜镜检、参照样本的选择，最终通过流式细胞仪推算出样品基因组大小的过程。本发明细胞核解离液配置简单，解离效率高，镜检效果明显，适用于金腰属各种植物的基因组大小的推算。为金腰的后续科学研究提供帮助，为金腰属植物的分类及开发应用研究奠定基础。

主权项

1.一种推算金腰属植物基因组大小的方法，其特征在于，所述方法的步骤为：(1).获取叶片：选取新鲜叶片1平方厘米左右；(2).预处理：加入0.5ml左右预冷的改良Hepes解离液，游离细胞核，所述改良Hepes解离液为10mmol/L MgSO₄·7H2O，50mmol/L KCl，5mmol/L Hepes(pH 8)，10mmol/L DTT，0.25％Triton X‑100，0.2mmol/L Tris·HCl；(3).细胞核悬浮液制备：使用滤膜将悬浮液过滤至1.5ml的离心管中，加入1/10体积的DAPI溶液，避光染色30分钟；(4).参照样本的选择：选取大豆新鲜叶片组织，与重复步骤(1)‑(3)，制备成细胞核悬浮液，备用；(5).镜检观察；(6).上机检测：先检测大豆细胞核悬浮液，再检测金腰属物种细胞核悬浮液；(7).样本基因组大小预测：通过比对参照样本与目标样本的峰值图，推算出金腰的基因组大小。