[发明专利]一种利用宏基因组或宏转录组检测微生物的分析方法有效

专利信息
申请号: 201910537997.7 申请日: 2019-06-20
公开(公告)号: CN110349629B 公开(公告)日: 2021-08-06
发明(设计)人: 龚浩;何雪莹;余旻斐;陈杰 申请(专利权)人: 湖南赛哲医学检验所有限公司
主分类号: G16B30/10 分类号: G16B30/10;G16B40/00
代理公司: 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 代理人: 段卉
地址: 410006 湖南省*** 国省代码: 湖南;43
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摘要: 发明公开了一种利用宏基因组或宏转录组检测微生物的分析方法。所述分析方法对测序下机数据进行数据质控,过滤后得到高质量数据,然后并行进行组装和双端拼接(单端则不拼接),组装和拼接所得数据基于bwa算法比对到微生物参考数据库,鉴定样本内微生物物种及其丰度信息。过滤低质量结果后整合分析结果。本发明方法适用范围广,能检测多种类型微生物,兼容多种主流测序平台,兼顾单端、双端测序数据及长读长、短读长序列数据特点,可从各类型测序数据准确地分析样本内微生物物种及其丰度。本发明方法能够有效降低假阳性,克服大部分微生物无法培养的难点,准确、快速、全面检测各类型样本内微生物。
搜索关键词: 一种 利用 宏基 转录 检测 微生物 分析 方法
【主权项】:
1.一种基于宏基因组或宏转录组测序的微生物检测鉴定分析方法,其特征在于,包括以下步骤:S1创建微生物参考数据库;S2.进行高通量测序,对测序数据进行数据质检及质控,得到高质量数据;S3.高质量数据的物种比对,包括以下步骤:S31对S2得到高质量数据进行组装,评估组装质量,将组装后数据比对到步骤S1中的微生物参考数据库,比对上微生物参考数据库的序列作为数据集1,统计数据集1所比对到的微生物物种信息、物种reads、reads占该物种比例、覆盖度、深度信息;S32对S2得到高质量数据,高通量测序为双端测序,数据进行双端拼接,评估拼接效果,拼接后数据比对到步骤S1中的微生物参考数据库,比对上微生物参考数据库作为数据集2,对S2得到高质量数据,高通量测序为单端测序,数据不进行拼接,比对到步骤S1中的微生物参考数据库,比对上微生物参考数据库作为数据集2,统计数据集2所比对到的微生物物种信息、物种reads、reads占该物种比例、覆盖度、深度信息;S4过滤数据集1、数据集2中比对质量低的序列、非特异性扩增序列、覆盖度低的序列及低复杂度序列;S5.结果整合:数据集1及数据集2能通过质量评估标准,则以数据集1的物种信息和数据集2的物种信息的交集为物种信息结果,数据集2的物种reads、reads占该物种比例、覆盖度、深度为对应物种的定量结果;数据集1未能通过质量标准,而数据集2通过质量标准,则选用数据集2的微生物物种信息、物种reads、reads占该物种比例、覆盖度、深度结果为鉴定结果;数据集2未能通过质量标准,数据1集通过质量标准,则选用数据集1的微生物物种信息、物种reads、reads占该物种比例、覆盖度、深度结果为鉴定结果;数据集1、数据集2均未能通过质量标准,则该检测结果无效。
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