[发明专利]一种人参皂苷的分离检测方法

摘要

一种人参皂苷的分离检测方法，包括以下步骤：将水与正丁醇等体积混合，待静置分层后取正丁醇相，然后加入人参粉末，超声处理后过滤并收集液相；然后制备硼酸修饰的介孔硅材料；将硼酸修饰的介孔硅材料超声扩散到萃取液中，然后将得到的液相加入萃取液中震荡萃取并最后离心分离；然后再经过清洗和解析，最后将得到的洗脱液分别进行硼亲和色谱分析和基质辅助激光解析电离质谱分析，然后将色谱分析与质谱分析的人参皂苷含量取平均值即可。本方法不需要复杂的预处理过程，而且具有优异的选择性，排除干扰。

主权项

1.一种人参皂苷的分离检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将水与正丁醇等体积混合，待静置分层后取正丁醇相10mL，然后加入1.0g人参粉末，超声处理60min后过滤并收集液相，超声频率为50kHz，然后加热蒸干液相中的水分得到母液；(2)取1.0g的CTAB和280mg的氢氧化钠溶解于480ml、80℃的水中，然后边搅拌边滴加5ml的TEOS，然后保持体系温度为80℃保持搅拌，反应2h，反应结束后将所的产物自然冷却，抽滤，依次用去离子水和乙醇洗涤，然后在40℃下真空干燥12h，得到的白色固体记做M1；(3)将M1超声分散于150mL甲醇中，随后加入1.5mL、质量分数为37.2％的浓盐酸中，在90℃下冷凝回流6h，反应结束后，将所的产物自然冷却，抽滤，用去离子水和乙醇洗涤，然后在60℃下真空干燥12h，得到介孔硅纳米颗粒记做M2；(4)将M2超声分散于80mL新制备的无水甲苯中，随后加入1.0mL APTES并在130℃下搅拌回流20h，所得的材料依次用去离子水和乙醇洗涤后在40℃下真空干燥12h，产物记做M3；(5)将M3溶于DMSO中，配置成混合液，混合液中M3的质量分数为20mg/mL，然后取0.15g的CPBA、0.2g的EDC和0.1g的NHS溶于5.0mL的DMSO中在室温下搅拌30min，随后加入到20mL混合液，保持室温搅拌24h后，依次用DMSO、去离子水、乙醇洗涤，然后在60℃下真空干燥12h，得到的材料即为硼酸修饰的介孔硅材料；(6)将硼酸修饰的介孔硅材料超声扩散到萃取液中，萃取液的添加量与硼酸修饰的介孔硅材料的质量之比为0.1‑2mL/mg，所述的萃取液由pH为7.4‑9.0磷酸钠缓冲溶液与甲醇混合而成，所述萃取液中甲醇所占比例为5％‑30％，然后将步骤(1)得到的母液加入萃取液中震荡萃取，萃取时间为20‑60min，最后离心分离出硼酸修饰的介孔硅材料，离心转速为10000r/min，离心时间为5min；(7)将步骤(6)离心分离出的硼酸修饰的介孔硅材料超声扩散到清洗液中，清洗液的添加量与硼酸修饰的介孔硅材料的质量之比为1‑3mL/mg，所述的清洗液由pH为7.4‑9.0磷酸钠缓冲溶液与甲醇混合而成，所述清洗液中甲醇所占比例为5％‑30％，然后进行震荡清洗，清洗时间为3‑5min，最后离心分离出硼酸修饰的介孔硅材料，离心转速为10000r/min，离心时间为5min；(8)将步骤(7)离心分离出的硼酸修饰的介孔硅材料超声扩散到解析液中，解析液的添加量与硼酸修饰的介孔硅材料的质量之比为0.1‑0.5mL/mg，所述的解析液由100mmol/L的醋酸溶液与甲醇混合而成，所述解析液中甲醇所占比例为50％，解析时间为20‑60min，最后离心分离出洗脱液，离心转速为10000r/min，离心时间为5min；(9)将步骤(8)得到的洗脱液分别进行硼亲和色谱分析和基质辅助激光解析电离质谱分析，然后将色谱分析与质谱分析的人参皂苷含量取平均值即可。