[发明专利]一种无外源蛋白干扰的ELISA标准品的制备方法在审
| 申请号： | 201910432003.5 | 申请日： | 2019-05-23 |
| 公开（公告）号： | CN110426513A | 公开（公告）日： | 2019-11-08 |
| 发明（设计）人： | 赵以睿;王慕元 | 申请（专利权）人： | 武汉三鹰生物技术有限公司 |
| 主分类号： | G01N33/531 | 分类号： | G01N33/531 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 430070 湖北省武汉市东*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明是一种无外源蛋白干扰的ELISA标准品的制备方法，属诊断试剂技术领域，包括以下步骤：a.配制冻存液基础液：配制三羟甲基氨基甲烷‑盐酸缓冲溶液（Tris‑HCl）的缓冲液摩尔浓度为0.05‑0.1 mol/L，调节pH至7.2‑7.4；缓冲液中依次加入2%甘露醇，5%‑10%海藻糖，0.05%‑0.1%Tween 20或0.05%‑0.1%Tween 80，0.03%‑0.05%proclin300得到冻干基础液；b.向冻干基础液中加入0%‑2%人重组白蛋白HSA，得到冻干工作液；c.将需要冻干的蛋白用冻干工作液稀释至需要准备的浓度；d.将上述标准蛋白加到玻璃瓶中，盖上橡胶塞并留空隙，然后至‑80度预冻4h以上，然后至冷冻干燥机冻干12小时以上，使用本发明得到的冻干品可以有效的保护极低浓度的标准品蛋白，4度4年以上，并且不会带来外源蛋白的干扰。 | ||
| 搜索关键词： | 冻干 标准品 基础液 蛋白 工作液 缓冲液 无外源 制备 配制 三羟甲基氨基甲烷 人重组白蛋白 盐酸缓冲溶液 冷冻干燥机 标准蛋白 外源蛋白 诊断试剂 保护极 玻璃瓶 冻存液 冻干品 甘露醇 海藻糖 橡胶塞 稀释 预冻 | ||
【主权项】：
1.一种 ELISA 标准品的制备方法，其特征在于包括以下步骤 ： a.配制冻存液基础液：配制Tris‑Hcl的缓冲液，摩尔浓度是0.05mol/L至0.1 mol/L，调节pH至7.2‑7.4；缓冲液中依次加入质量分数是2%‑5%的甘露醇，质量分数是5%‑10%的海藻糖，0.05%‑0.1% Tween 20或0.05%‑0.1% Tween 80，体积比是0.03%‑0.05%的proclin300得到冻干基础液；b.向冻干基础液中加入0%‑2%人重组白蛋白HSA，得到冻干工作液；c．将需要冻干的蛋白用冻干工作液稀释至需要准备的浓度，将所述标准蛋白加到玻璃瓶中，盖上橡胶塞并留空隙 ，然后至‑80度预冻4h以上，然后至冷冻干燥机冻干12小时以上，并且在压力保持10pa以下时冻干完成，并用铝箔盖压盖。
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