[发明专利]一种无外源蛋白干扰的ELISA标准品的制备方法在审
申请号: | 201910432003.5 | 申请日: | 2019-05-23 |
公开(公告)号: | CN110426513A | 公开(公告)日: | 2019-11-08 |
发明(设计)人: | 赵以睿;王慕元 | 申请(专利权)人: | 武汉三鹰生物技术有限公司 |
主分类号: | G01N33/531 | 分类号: | G01N33/531 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 430070 湖北省武汉市东*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 冻干 标准品 基础液 蛋白 工作液 缓冲液 无外源 制备 配制 三羟甲基氨基甲烷 人重组白蛋白 盐酸缓冲溶液 冷冻干燥机 标准蛋白 外源蛋白 诊断试剂 保护极 玻璃瓶 冻存液 冻干品 甘露醇 海藻糖 橡胶塞 稀释 预冻 | ||
1.一种 ELISA 标准品的制备方法,其特征在于包括以下步骤 : a.配制冻存液基础液:配制Tris-Hcl的缓冲液,摩尔浓度是0.05mol/L至0.1 mol/L,调节pH至7.2-7.4;缓冲液中依次加入质量分数是2%-5%的甘露醇,质量分数是5%-10%的海藻糖,0.05%-0.1% Tween20或0.05%-0.1% Tween 80,体积比是0.03%-0.05%的proclin300得到冻干基础液;b.向冻干基础液中加入0%-2%人重组白蛋白HSA,得到冻干工作液;c.将需要冻干的蛋白用冻干工作液稀释至需要准备的浓度,将所述标准蛋白加到玻璃瓶中,盖上橡胶塞并留空隙 ,然后至-80度预冻4h以上,然后至冷冻干燥机冻干12小时以上,并且在压力保持10pa以下时冻干完成,并用铝箔盖压盖。
2.根据权利要求 1 所述 ELISA 标准品的制备方法,其特征在于:所述 a 步中 Tris-Hcl的缓冲液,摩尔浓度是0.05mol/L,PH=7.3,质量分数是2%的甘露醇,质量分数是10%的海藻糖,体积比是0.1% Tween 80,体积比是0.03%-0.05%的proclin300。
3.根据权利要求 2 所述 ELISA 标准品的制备方法,其特征在于:所述 b 步骤中人重组白蛋白HSA的质量分数是1%。
4.根据权利要求 2 或 3 所述 ELISA 标准品的制备方法,其特征在于 :所述 c步中玻璃瓶规格是10 ml,每瓶存放 1ml 标准浓度蛋白溶液。
5.根据权利要求 4 所述 ELISA 标准品的制备方法,其特征在于 :所述标准蛋白加到玻璃瓶中,盖上橡胶塞并留空隙 ,然后至-80度预冻4h以上,然后至冷冻干燥机冻干12小时以上,并且在压力保持10pa以下时冻干完成,并用铝箔盖压盖。
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