[发明专利]一种基于蚕蛹混合制剂的制作和功能的研究方法

摘要

本发明公开了一种基于蚕蛹混合制剂的制作和功能的研究方法，包括以下步骤：S1：蚕蛹蛋白粉的制备方法：将鲜蚕蛹用匀浆器匀浆备用，所得匀浆液用五层医用纱布过滤以除去蚕蛹壳等残渣，用PBS(15mmol/l NaCO3，35mmol/l NaHCO3,pH 9.6)缓冲液将滤过液稀释一倍，离心后用医用注射器将油脂层下的清液吸取出来，提取蛋白质，再用稀硫酸调节PH值，本发明涉及蚕蛹技术领域。该基于蚕蛹混合制剂的制作和功能的研究方法，其实验结果表明，使用蚕蛹蛋白和蚕蛹油的混合制剂喂养转基因小鼠，能够使转基因小鼠的认知和记忆能力具有明显改善，并能显著改善阿尔茨海默病模型小鼠的主要病理特征‑β淀粉样蛋白沉积斑(老年斑)，板块面积显著减少，对阿尔茨海默病具有防治作用。

主权项

1.一种基于蚕蛹混合制剂的制作和功能的研究方法，其特征在于：包括以下步骤：S1：蚕蛹蛋白粉的制备方法：将鲜蚕蛹用匀浆器匀浆备用，所得匀浆液用五层医用纱布过滤以除去蚕蛹壳等残渣，用PBS(15mmol/l NaCO3，35mmol/l NaHCO3,pH 9.6)缓冲液将滤过液稀释一倍，离心后用医用注射器将油脂层下的清液吸取出来，提取蛋白质，再用稀硫酸调节PH值，将PH值调节至4.0，沉淀后低速离心分离蚕蛹粗蛋白，氧化剂脱色用纯净水反复洗涤并低速离心，最后进行喷雾干燥获得蚕蛹蛋白粉；S2：蚕蛹油的制备方法：将一部分蚕蛹匀浆装入多功能提取罐装料桶中，加石油醚浸提，浓缩后加入4％的氢氧化钠‑95％乙醇溶液皂化，盐酸酸化后再用石油醚萃取制得蚕蛹油；S3：混合：将S1中制备的蚕蛹蛋白粉和S2中制备的蚕蛹油按照重量以2:8的比例进行混合；S4：用S3中蚕蛹蛋白和蚕蛹油的混合制剂饲喂阿尔茨海默病模型小鼠(B6C3‑Tg)，测试小鼠的认知和记忆能力：将5周龄的阿尔茨海默病小鼠分成实验组和对照组(每组八只，雌雄各半)，实验组每只小鼠每周饲喂4g全蚕蛹蛋白粉和蚕蛹油的混合物；对照组不服用任何蚕蛹粉，每日只饲喂鼠粮，阿尔茨海默病模型小鼠从5周龄开始饲喂，直至13月龄，应用水迷宫测试学习和记忆的获取能力，然后分别进行定位航行试验和空间搜索试验。