[发明专利]一种用于分离肿瘤细胞的分离管的制备方法有效
| 申请号： | 201910366411.5 | 申请日： | 2019-05-05 |
| 公开（公告）号： | CN110029090B | 公开（公告）日： | 2021-10-22 |
| 发明（设计）人： | 王春香;刘勇 | 申请（专利权）人： | 江苏康为世纪生物科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/09 | 分类号： | C12N5/09 |
| 代理公司： | 北京惠智天成知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11681 | 代理人： | 周建 |
| 地址： | 225300 江苏省*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明提供一种用于分离肿瘤细胞的分离管的制备方法，属于细胞分离技术领域，先向分离管内加入分离胶，离心使其沉到管底，再加入分离介质，然后将体腔积液或抗凝全血缓慢加入到分离介质的上层，室温离心后，先吸弃分离管最上面的液体以除去细胞碎片，然后将分离胶层上方的剩余液体倾倒入收集管中，再进行室温离心后，用PBS重悬细胞后即可获得肿瘤细胞，所述分离胶的密度为1.06‑1.08g/mL，所述分离介质的密度为1.05‑1.06g/mL。本发明可用于分离循环肿瘤细胞和体腔积液肿瘤细胞，制备方法简便高效，且分离得到的肿瘤细胞的纯度较高。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 用于 分离 肿瘤 细胞 制备 方法 | ||
【主权项】：
1.一种用于分离肿瘤细胞的分离管的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：S1：先将密度为1.06‑1.08g/mL的分离胶加入到分离管中，室温条件下，设定离心力为1000‑1200g，离心3‑10min，使分离胶沉于分离管管底；S2：再将密度为1.05‑1.06g/mL的分离介质加入到分离胶上层；S3：将肿瘤患者穿刺得到的体腔积液或抗凝全血缓慢加入到分离介质的上层，室温条件下，设定离心力为1000‑1200g，离心8‑12min，分离管中部形成不通透的分离胶层，将分离胶层上方的肿瘤细胞和分离胶层下方的非目的细胞有效分开；S4：吸弃分离管内最上面的液体以除去细胞碎片，吸弃液位于分离胶层的上方；S5：然后将分离胶层上方剩余液体倾倒至收集管中，室温条件下，设定离心力为800‑1000g，离心3‑10min，再用PBS重悬细胞后即可获得肿瘤细胞。
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