[发明专利]一种用于分离肿瘤细胞的分离管的制备方法有效
| 申请号： | 201910366411.5 | 申请日： | 2019-05-05 |
| 公开（公告）号： | CN110029090B | 公开（公告）日： | 2021-10-22 |
| 发明（设计）人： | 王春香;刘勇 | 申请（专利权）人： | 江苏康为世纪生物科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/09 | 分类号： | C12N5/09 |
| 代理公司： | 北京惠智天成知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11681 | 代理人： | 周建 |
| 地址： | 225300 江苏省*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 分离 肿瘤 细胞 制备 方法 | ||
1.一种用于分离肿瘤细胞的分离管的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1：先将密度为1.06-1.08g/mL的分离胶加入到分离管中，室温条件下，设定离心力为1000-1200g，离心3-10min，使分离胶沉于分离管管底；
S2：再将密度为1.05-1.06g/mL的分离介质加入到分离胶上层，所述分离胶与所述分离介质的体积比为1:4-1:3，所述分离胶和所述分离介质的总体积与所述分离管的体积比为1:2-1:1；
S3：将肿瘤患者穿刺得到的体腔积液或抗凝全血缓慢加入到分离介质的上层，体腔积液或抗凝全血与所述分离介质的体积比为1:1，室温条件下，设定离心力为1000-1200g，离心8-12min，分离管中部形成不通透的分离胶层，将分离胶层上方的肿瘤细胞和分离胶层下方的非目的细胞有效分开；
S4：吸弃分离管内最上面的液体以除去细胞碎片，吸弃液位于分离胶层的上方，所述吸弃液体积与所述分离胶层上方剩余液体体积比为1:3-1:2；
S5：然后将分离胶层上方剩余液体倾倒至收集管中，室温条件下，设定离心力为800-1000g，离心3-10min，再用PBS重悬细胞后即可获得肿瘤细胞；
所述分离胶为聚脂、羟基硅油、聚烯烃、有机聚硅氧烷、丙烯中任意一种或任意若干种的混合液，所述分离胶具有触变性特点；所述分离介质为Percoll。
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