[发明专利]利用选择性过滤柱对生物样本中RNA进行纯化的方法

摘要

本发明公开了一种利用选择性过滤柱对生物样本中RNA进行纯化的方法，具体如下：将RNA裂解缓冲液处理后的生物样本进行高速离心分层，将上层水相加入选择性过滤柱的内管中，同时将选择性过滤柱在离心机中离心；向选择性过滤柱内管中加入5‑100微升水，震荡30s后，将选择性过滤柱内管内的水溶液转移至无RNA酶的离心管内，此时离心管的溶液即为纯化后的RNA溶液；利用RNA裂解缓冲液将生物样本细胞进行裂解，高速离心分层去除细胞碎片和DNA后，RNA完全有利于上层水相中，再通过选择性过滤柱的底部的超滤膜，再高速离心情况下，超滤膜仅对小分子物质具有透过性，对生物大分子物质RNA无透过性，进而能够实现大分子物质RNA的纯化。

主权项

1.利用选择性过滤柱对生物样本中RNA进行纯化的方法，其特征在于：具体包括以下步骤：第一步，将生物样本采用RNA裂解缓冲液处理后，在12000‑16000r/min下进行高速离心分层，将上层水相加入选择性过滤柱的内管中，接着将选择性过滤柱放入离心机中，在3000‑10000r/min下离心1‑10min，将小分子物质过滤除去；第二步，向选择性过滤柱内加入5‑100微升水，震荡30s后，将选择性过滤柱内的水溶液转移至干净的离心管内，此时离心管中的溶液即为纯化浓缩后的溶液；其中，所述选择性过滤柱包括外管和套设在外管内部的内管，内管的管底开有出液口，出液口处一体连接固定有出液管，同时内管的侧壁内表面位于出液口的上方安装有支撑板，支撑板的表面开有若干滤液孔，同时支撑板的表面从下到上依次设有超滤膜和密封压圈，密封压圈压紧在超滤膜的表面，所述RNA裂解缓冲液包含两个组分，组分一各成份重量百分比为：40‑55％水饱和苯酚、40‑60％异硫氰酸胍、0.5‑2.5％醋酸钠、0.1‑2％巯基乙醇、0‑0.3％8‑羟基喹啉，pH值为4.0‑4.5；组分二的成分为氯仿。