[发明专利]利用选择性过滤柱对生物样本中RNA进行纯化的方法

权利要求书

1.利用选择性过滤柱对生物样本中RNA进行纯化的方法，其特征在于：具体包括以下步骤：

第一步，将生物样本采用RNA裂解缓冲液处理后，在12000-16000r/min下进行高速离心分层，将上层水相加入选择性过滤柱的内管中，接着将选择性过滤柱放入离心机中，在3000-10000r/min下离心1-10min，将小分子物质过滤除去；

第二步，向选择性过滤柱内加入5-100微升水，震荡30s后，将选择性过滤柱内的水溶液转移至干净的离心管内，此时离心管中的溶液即为纯化浓缩后的溶液；

其中，所述选择性过滤柱包括外管和套设在外管内部的内管，内管的管底开有出液口，出液口处一体连接固定有出液管，同时内管的侧壁内表面位于出液口的上方安装有支撑板，支撑板的表面开有若干滤液孔，同时支撑板的表面从下到上依次设有超滤膜和密封压圈，密封压圈压紧在超滤膜的表面，所述RNA裂解缓冲液包含两个组分，组分一各成份重量百分比为：40-55％水饱和苯酚、40-60％异硫氰酸胍、0.5-2.5％醋酸钠、0.1-2％巯基乙醇、0-0.3％8-羟基喹啉，pH值为4.0-4.5；组分二的成分为氯仿。

2.根据权利要求1所述的利用选择性过滤柱对生物样本中RNA进行纯化的方法，其特征在于：RNA具体纯化的过程如下：①对生物样本进行前处理，取不超过100mg的生物样本，加入1ml RNA裂解缓冲液组分一，对样本进行充分研磨或匀浆，室温静置5-10min后，加入200ul RNA裂解缓冲液组分二，涡旋震荡混匀，在12000r/min下离心5-10min；②将步骤①中的上层水相转移至选择性过滤柱内；③将步骤②中的选择性过滤柱放入高速离心机中，在3000-10000r/min下离心1-10min，将小分子物质过滤除去；④往步骤③中的选择性过滤柱中加入5-100微升水，震荡30s后，将选择性过滤柱内的水溶液转移至干净的离心管内，此时离心管的溶液即为纯化后的RNA溶液。

3.根据权利要求1所述的利用选择性过滤柱对生物样本中RNA进行纯化的方法，其特征在于：所述超滤膜为孔径范围为1-100nm的微孔过滤膜。

4.根据权利要求1所述的利用选择性过滤柱对生物样本中RNA进行纯化的方法，其特征在于：所述的超滤膜的材质为纤维素、纤维素的衍生物、聚偏氟乙烯、聚砜、聚丙烯腈、聚酰胺交链的聚乙烯醇、改性丙烯酸聚合物、聚碳酸酯、聚氯乙烯、聚砜酰胺、磺化聚砜中的一种，或其它能制成孔径范围为1-20nm超滤膜的材质。