[发明专利]一种从大鲵中提取功能蛋白的方法

摘要

本发明涉及生物工程技术领域，具体为一种从大鲵中提取功能蛋白的方法，其包括步骤：前处理、酸碱处理、热水提取、液相分离、酶解、过滤、减压浓缩和离心喷雾干燥，通过对大鲵进行清洗并且高度粉碎获得的大鲵骨肉糜，先利用酸处理将大鲵骨中的钙盐等消化再利用碱处理使大鲵皮肉中的脂质去除。大鲵经过前处理后利用蛋白肽以及非肽物质对热的稳定性不同，对大鲵骨肉进行高温提取。提取液经过不同酶试剂对肽的剪切，得到均匀的酶剪切液。后续通过对酶剪切液进行不同渗透膜的浓缩过滤，得到分子量在一定范围内的小肽，且该分子量范围的肽占肽的85%以上，可以大大增加吸收效率、对不同分子量范围的肽产品功效性研究提供良好基础。

主权项

1.一种从大鲵中提取功能蛋白的方法，其特征在于，所述方法按照以下步骤进行：步骤S1，去除大鲵内脏及四肢、血液放净后，进行切块，再将大鲵骨肉块头投入破骨机中，得到大鲵骨肉糜；步骤S2，将上述步骤S1中的大鲵骨肉糜投入脱灰罐，加入纯净水清洗后，再加入大鲵重量2倍的稀释后盐酸进行脱灰处理，时间0.5h，处理完毕加入纯净水清洗两次，再用1%质量分数的食品级氢氧化钠进行中和、调节PH值为10.0，碱处理0.5h后用水清洗，直至pH值洗至7.0～8.0；步骤S3，将上述步骤S2中的物料从脱灰罐转至提取罐，加入大鲵骨肉重的3～4倍纯净水，升温至95℃、持续提取3h，过程中用搅拌桨持续搅拌；步骤S4，待上述步骤S3提取完成后，关闭搅拌桨，停止搅拌，待提取罐降至室温，静置12h待分层，将上层油脂离心分离，得提取液；步骤S5，将上述步骤S4中的提取液投入酶解罐，升温至55～65℃，调整到酶的最佳反应条件，再按照顺序依次加入第一酶制剂、第二酶制剂、第三酶制剂，反应结束后升温至95℃，保持30min将酶灭活得到酶解液；步骤S6，将上述步骤S5中的所得酶解液降温至50～60℃，进行脱味处理，将板框过滤机用硅藻土进行预涂，在酶解液中加入大鲵重量的2～4%的活性炭混合搅拌0.5h，再加压经过板框过滤机，直至滤液呈黄色澄清透明液体；步骤S7，将上述步骤S6中所得的黄色澄清透明液体，采用复合管式膜等渗透膜进行一定分子量的溶质和溶剂分离；步骤S8，将上述步骤S7中分离后的溶剂再采用纳滤膜进行150～1000Dal有机小分子的分离；步骤S9，将上述步骤S8中分离出的滤液利用双效浓缩器减压升温，待滤液浓缩到可溶性固形物含量达40～60%时进行离心喷雾干燥，制得蛋白粉。