[发明专利]一种法医探针荧光标记基因残留控制的方法

摘要

本发明公开一种法医探针荧光标记基因残留控制的方法，采用探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被灭基团吸收；PCR扩增时，Taq酶的5'‑3’外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。这种实时荧光定量PCR技术重复性好，特异性高，灵敏性高，可多重PCR。应用到该方法中的离心沉淀干燥一体机，可以稳定、可控、高效地完成连续多个试管的离心搅拌与干燥操作。

主权项

1.一种法医探针荧光标记基因残留控制的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)将样品抽干后放入试管，加入100uL超纯水充分震荡以萃取引物，保证引物完全溶解；再加入500uL丙酮震荡，装有引物溶液的试管(3)沿离心沉淀干燥一体机上的试管孔(355)、容置腔(63)放入容置框(62)内，使试管(3)底部贴合在缓冲棉(66)上，第五螺杆(48)向内拧紧，使得海绵垫(64)贴合在试管(3)的外壁部，启动调节电机(33)，调节电机(33)的正转或反转带动联轴器(34)、安装轴(36)旋转，进一步带动圆形转盘(35)的旋转，当需要干燥的试管移动到离心搅拌机构的正下方时，调节保护外壳(43)在第一紧固环(24)上的紧固位置，调节搅拌桨(44)进入试管内的深度，同时将试管保护板(49)绕第五螺杆(48)转动，使其抵靠在试管(3)的外壁上部；开启高速电机(41)，调节功率，高速电机(41)带动搅拌器(42)、搅拌桨(44)搅拌离心，在13200rpm的转速下搅拌离心5min；2)试管取出后倒出留存上清液，用70vt％的冰乙醇冲洗三下后倒置以冲洗管壁和管盖；3)启动调节电机(33)，正转或反转带动该试管旋转到干燥机构的正下方，从进气部(51)通入高温干燥气体，气体沿进气部(51)、多流道体(52)、送气部(53)进入试管内，对试管内进行多流道的高温干燥吹扫，使液体迅速气化挥发，试管内达到60℃时，干燥5‑10min即可。