[发明专利]一种葡萄新品种快速培育的方法

摘要

一种葡萄新品种快速培育的方法，它涉及一种致力于缩短杂交育种时间，具有优良性状的葡萄新品种培育方法。本发明通过结合新疆本土特色品种白木纳格葡萄优质果实特点，同时兼具莫莉莎葡萄品种和火焰无核葡萄品种的特殊玫瑰香味，突破了葡萄杂交育种方法周期性较长、所需性状出现的频率较低的技术问题，发明了一种新的葡萄优势品种。本方法采用一般杂交技术，技术步骤包括杂交(a父本花粉采集；b母本去雄；c杂交授粉)、杂交胚珠及成苗培养(d取胚；e胚珠培养；f切胚；g胚萌发培养；h成苗培养)、扩繁及移栽(i扩繁；j练苗；k移栽；l高接)和果实品质鉴定。本发明方法特色性的采用高营养的幼苗阶段管理模式，同时联合采用了胚挽救和高接相结合的育种手段，缩短了传统葡萄杂交育种的周期，培育出的葡萄新品种具备目标性状。

主权项

1.一种葡萄新品种快速培育的方法，其特征在于葡萄培育的方法按照以下步骤进行：一、杂交：a、父本花粉采集5月上旬采集莫利莎葡萄的花粉；b、母本去雄5月中旬将50穗白木纳格葡萄标记，去雄后套袋；c、杂交授粉两天后的早晨，用莫利莎的花粉给去雄的白木纳格授粉，间隔一天重复一次；二、杂交胚珠及成苗培养：d、取胚准备培养基：以1L Nitsch培养基为基本培养基，添加2.0mg IBA、0.5mg GA₃、0.5mg 6‑BA、1.0g活性炭，各30毫升分装于玻璃三角瓶中，高温灭菌；当年7月初，采集白木纳格与莫利莎杂交后的果实，果粒留果柄从果穗剪下，用自来水、无菌水冲洗果实两遍，晾干10分钟，用75％的酒精浸泡果粒并搅动5分钟，送进超净工作室，在超净工作室中将浸泡果粒的酒精倒入500ml空杯，倒200ml酒精到另一个500ml玻璃杯中，再将果粒夹入200ml酒精中浸泡5分钟，滤干；用75％的酒精清洗双手，戴无菌手套，在超净工作室中，用一只手抓住果柄及果实上部，另一只手持手术刀在果粒靠近果柄2/5处横切一圈，深入果肉2mm，双手掰开果实，看清胚着生部位，第二刀从中竖切一刀成两半，用另一把刀的刀尖将胚珠挑入培养基中，每瓶播种胚珠20粒，每瓶胚珠播种完，将瓶口在酒精灯灭菌后盖严，将2把手术刀在酒精灯上灭菌；e、胚珠培养在温度为25℃、相对湿度45％、光强度2000lx、每天光照12h的条件下，将胚珠放入光照培养箱中进行离体培养60d；f、切胚准备胚萌发培养基：以1L Nitsch培养基为基本培养基，添加1.0mg IBA、0.2mg GA₃、1.0mg 6‑BA、0.5g活性炭，各30毫升分装于玻璃三角瓶中，高温灭菌；9月初，在超净工作台中，将胚珠用镊子夹住，放在培养皿上，用手术刀从中间横切，胚乳放入胚萌发培养基，每瓶播种10‑12粒；每瓶播种完，将瓶口在酒精灯灭菌后盖严，将镊子、手术刀在酒精灯上灭菌，培养皿用无菌水冲洗；g、胚萌发培养在温度为25℃、相对湿度45％、光强度2000lx、每天光照12h的条件下，将胚乳放入光照培养箱中进行离体培养10d‑20d，至胚开始萌发，长出胚芽和细根；h、成苗培养将胚芽接入添加IBA浓度为0.1mg/L、活性炭浓度为1.0g/L、蔗糖浓度为30g/L的1/2MS培养基中，每瓶1芽，分别标记，在温度为25℃、相对湿度45％、光强度2000lx、每天光照12h的条件下，在培养箱中培养30d；三、扩繁及移栽：i、扩繁将长有8‑10片叶的幼苗剪成每芽一段，接种到MS培养基中，分别标记，在组培室培养，15d‑25d左右继续扩繁；j、练苗第二年2月中旬，选择根为4‑5条、长3‑5cm、叶子为4‑5片，茎秆粗壮，基部无愈伤组织的壮苗，将三角瓶封口膜解开透气锻炼苗2‑3天；将基质加水润湿后采用120℃灭菌30min，装入纸杯体积的1/3；用无菌水冲洗幼苗根系后移栽到纸杯中，再加纸杯体积1/3的基质，上扣塑料杯，分别标记；在组培室进行炼苗，温度控制在18‑25℃、相对湿度60％‑70％、光照强度1200lx，每周浇灌1000倍的多菌灵和稀释30％的MS营养液各50mL；20天后，通过斜放的方式，逐步扩大塑料杯的通风口位置至杯口1/3处；k、移栽第二年3月下旬，幼苗连同底部穿洞透水的纸杯移栽到温室中，分别标记，按照500ml/株灌足定根水并遮阴；15天后去除塑料杯和遮阴，20天为一周期灌水，同时补充10g尿素、10g磷酸钾；每月叶面喷质量浓度为25％的多菌灵可湿性粉剂500倍液，质量浓度为25％的多菌灵可湿性粉剂500倍液中尿素的质量浓度为0.3％、百菌清水乳剂1000倍液交替使用预防病虫害；每株留1蔓，副梢留2叶反复摘心，株高达到2m摘心；11月初停止生长，饱满芽30个以上，径粗0.8厘米以上；l、高接第二年5月末，采用绿枝嫁接技术，将温室中杂交苗半木质化的芽高接到大树上，分别标记，分别在6月、7月、8月，以20天为灌水周期，每月补加200g尿素+100g磷酸钾/株，8月底结束，可提早打破童期；四、鉴定l、鉴定第三年1月初，温室升温，按照温室葡萄栽培管理技术要求进行管理；5月份对有果实的株系进行品质评价，筛选出优株；m、高接第三年5月中旬，采用绿枝嫁接技术，将优株半木质化的芽高接到大树上，分别标记；第四年重复l、鉴定和m、高接，筛选出有特殊玫瑰香味、红色、早熟、粒重6‑8g的优株；优选单株保留种条扩繁；五、区试第五年5月，将优选单株繁育的营养袋苗定植于苗圃；优株绿枝高接扩繁；优株评价；第六年，优株区试并评价；扩繁；第七年，优株区试并评价，示范推广。