[发明专利]siRNA干扰对大鼠血管平滑肌细胞活性影响的检测方法在审
| 申请号： | 201910244293.0 | 申请日： | 2019-03-28 |
| 公开（公告）号： | CN110055319A | 公开（公告）日： | 2019-07-26 |
| 发明（设计）人： | 李梅;秦秀军;刘梦雅;尹晶晶;李建国 | 申请（专利权）人： | 中国辐射防护研究院 |
| 主分类号： | C12Q1/6876 | 分类号： | C12Q1/6876;G01N33/68;G01N33/577 |
| 代理公司： | 北京天悦专利代理事务所(普通合伙) 11311 | 代理人： | 田明;周敏毅 |
| 地址： | 030006 山*** | 国省代码： | 山西;14 |
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| 摘要： | 本发明属于细胞检测技术领域，涉及siRNA干扰对大鼠血管平滑肌细胞活性影响的检测方法。所述的检测方法包括如下步骤：(1)原代培养大鼠血管平滑肌细胞；(2)对大鼠血管平滑肌细胞进行siRNA转染；(3)检测AP‑1及下游基因的mRNA的表达，检测c‑Fos、c‑Jun、AP‑1下游基因的蛋白的表达，检测AP‑1活性；(4)检测大鼠血管平滑肌细胞的细胞周期及增殖的变化，检测细胞迁移情况；(5)检测SM‑αactin的mRNA的表达，检测SM‑αactin的蛋白的表达，观察大鼠血管平滑肌细胞分化情况；(6)检测MMP‑2、TIMP‑2的mRNA的表达，检测MMP‑2和u‑PA的蛋白的表达，分析MMP‑2和MMP‑9活性。利用本发明的检测方法，能够确定siRNA干扰对大鼠血管平滑肌细胞活性影响规律，找到AP‑1+BsiRNA的作用机制。 | ||
| 搜索关键词： | 检测 血管平滑肌细胞 大鼠 活性影响 蛋白 下游基因 细胞检测 细胞迁移 细胞周期 原代培养 作用机制 增殖的 转染 分化 观察 分析 | ||
【主权项】：
1.siRNA干扰对大鼠血管平滑肌细胞活性影响的检测方法，其特征在于，所述的检测方法包括如下步骤：(1)原代培养大鼠血管平滑肌细胞；(2)对大鼠血管平滑肌细胞进行siRNA转染；(3)检测AP‑1及下游基因的mRNA的表达，检测c‑Fos、c‑Jun、AP‑1下游基因的蛋白的表达，检测AP‑1活性；(4)检测大鼠血管平滑肌细胞的细胞周期及增殖的变化，检测细胞迁移情况；(5)检测SM‑αactin的mRNA的表达，检测SM‑αactin的蛋白的表达，观察大鼠血管平滑肌细胞分化情况；(6)检测MMP‑2、TIMP‑2的mRNA的表达，检测MMP‑2和u‑PA的蛋白的表达，分析MMP‑2和MMP‑9活性。
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