[发明专利]非囊膜病毒的代谢修饰与原位生物正交标记方法及应用在审
申请号: | 201910217713.6 | 申请日: | 2019-03-21 |
公开(公告)号: | CN109897881A | 公开(公告)日: | 2019-06-18 |
发明(设计)人: | 蔡林涛;王芳芳;潘宏;马轶凡;何华美 | 申请(专利权)人: | 中国科学院深圳先进技术研究院 |
主分类号: | C12Q1/04 | 分类号: | C12Q1/04;C12R1/91 |
代理公司: | 北京市诚辉律师事务所 11430 | 代理人: | 范盈 |
地址: | 518055 广东省深圳*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了非囊膜病毒的代谢修饰与原位生物正交标记方法及应用,具体公开了一种非囊膜病毒的荧光标记方法或一种荧光标记的非囊膜病毒的制备方法,其特征在于包括以下步骤:S01.活性基团修饰宿主细胞;S02.活性基团修饰病毒粒子;S03.以荧光探针标记病毒粒子;本发明首次给出了针对非囊膜病毒的标记方法,该方法制备简单,对病毒和宿主细胞的活性影响较小。同时首次发明了应用于野生非囊膜病毒株的标记方法,这大大增加了应用范围,可以用于研究病毒的核酸释放和复制扩增等行为。 | ||
搜索关键词: | 囊膜病毒 活性基团修饰 病毒粒子 代谢修饰 宿主细胞 荧光标记 原位生物 应用 正交 制备 病毒 荧光探针标记 核酸释放 活性影响 扩增 复制 研究 | ||
【主权项】:
1.一种非囊膜病毒的荧光标记方法或一种荧光标记的非囊膜病毒的制备方法,其特征在于包括以下步骤:S01.活性基团修饰宿主细胞:在宿主细胞培养过程中添加单糖活性基团衍生物或者使用去除特定氨基酸的营养缺陷型培养基并补加对应的氨基酸活性基团衍生物的培养基培养病毒宿主细胞,使活性基团通过细胞内糖代谢或氨基酸代谢连接到宿主细胞膜的糖蛋白或蛋白质上,得到被活性基团修饰的宿主细胞;S02.活性基团修饰病毒粒子:将病毒株加入被活性基团修饰的宿主细胞中,进行培养,获得活性基团修饰的病毒粒子;S03.以荧光探针标记病毒粒子:将获得的活性基团修饰的病毒粒子感染其宿主细胞,清洗后加入携带反应基团的荧光探针在细胞培养箱中孵育,即可获得荧光标记的非囊膜病毒;所述反应基团为能够与活性基团发生生物正交反应的基团。
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