[发明专利]一种高产透明质酸寡糖的重组枯草芽孢杆菌的构建方法有效
| 申请号： | 201910164544.4 | 申请日： | 2019-03-05 |
| 公开（公告）号： | CN110055201B | 公开（公告）日： | 2021-05-28 |
| 发明（设计）人： | 康振;韦朝宝;陈坚;堵国成 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12P19/26;C12R1/125 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 林娟 |
| 地址： | 214000 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： |
本发明公开了一种高产透明质酸寡糖的重组枯草芽孢杆菌的构建方法，属于生物工程技术领域。本发明选择yoyJ‑yoyA、lytH、lytD、lytG、lytC作为整合位点，将途径基因glmM、glmS、glmU、tuaD和水蛭来源的透明质酸水解酶基因H6LHyal整合到枯草芽孢杆菌基因组中，不仅提高了透明质酸寡糖的产量，还提高了生物量、有利于后期进行透明质酸寡糖的分离纯化。在3L发酵罐发酵40h时透明质酸寡糖的产量达36.04g/L。其3L发酵罐水平的透明质酸平均分子量HA Mw约为3.3×10 |
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| 搜索关键词： | 一种 高产 透明 寡糖 重组 枯草 芽孢 杆菌 构建 方法 | ||
【主权项】：
1.一种用于生产透明质酸寡糖的重组枯草芽孢杆菌，其特征在于，整合表达了透明质酸寡糖合成途径的基因，所述重组枯草芽孢杆菌在基因组yoyJ‑yoyA、lytH、lytD、lytG、lytC位点分别整合了基因glmM、glmS、glmU、tuaD和水蛭来源的透明质酸水解酶基因H6LHyal，均以P43启动子为启动子，同时，表达兽疫链球菌来源和巴斯德杆菌来源的透明质酸合酶HasA，并用基于sRNA介导的枯草芽孢杆菌转录后调控系统bsrE/sr5下调旁路途径基因zwf、pfkA、mnaA、murAA、murAB的表达水平。
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