[发明专利]一种磷脂酶D的编码基因及其表达和应用在审
申请号: | 201910148529.0 | 申请日: | 2019-02-28 |
公开(公告)号: | CN110004124A | 公开(公告)日: | 2019-07-12 |
发明(设计)人: | 龚劲松;史劲松;许正宏;侯海娟;陈杰鹏;段丽丽 | 申请(专利权)人: | 江南大学;广东双骏生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N9/16 | 分类号: | C12N9/16;C12N15/55;C12N15/70;C12P13/06 |
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地址: | 214122 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明为一种磷脂酶D的编码基因及其表达和应用,提供了一种利用大肠杆菌E.coli BL21表达重组磷脂酶D并利用其产生磷脂酰丝氨酸的方法。该方法包括对重组质粒pET‑28a(+)‑sspld的构建、重组质粒转化至E.coli BL21及利用重组菌催化产生磷脂酰丝氨酸。重组菌株可成功表达磷脂酶D,酶活达到17.07U/mL。通过诱导条件优化,重组菌酶活最高可达38.58U/mL。经HPLC检测,该酶具有良好的转磷脂酰基能力,能以卵磷脂和L‑丝氨酸为底物合成产物磷脂酰丝氨酸,转化率可达28%,产量达到1.34g/L。该重组磷脂酶D发酵周期短,催化性能良好,为其实际应用奠定了基础。 | ||
搜索关键词: | 磷脂酰丝氨酸 磷脂酶D 重组磷脂酶 编码基因 重组菌 酶活 应用 重组质粒转化 大肠杆菌 卵磷脂 催化性能 发酵周期 合成产物 磷脂酰基 诱导条件 重组菌株 重组质粒 丝氨酸 底物 构建 催化 优化 成功 | ||
【主权项】:
1.一种磷脂酶D,其特征在于:其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
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